超聲造影與血清學(xué)檢查評(píng)價(jià)大鼠肝纖維化的對(duì)比研究.pdf

1、[目的]應(yīng)用活體大鼠肝纖維化模型，觀測(cè)超聲造影在不同程度肝纖維化的血流動(dòng)力學(xué)參數(shù)變化，探討超聲造影在不同肝纖維化進(jìn)展過(guò)程中的微循環(huán)表現(xiàn)。分析動(dòng)物模型肝臟超聲造影結(jié)果、肝纖維化血清學(xué)指標(biāo)與病理學(xué)結(jié)果之間的相關(guān)性，探討超聲造影在肝纖維化無(wú)創(chuàng)性診斷中的應(yīng)用價(jià)值。
　　 [方法]1、60只雄性SD大鼠，隨機(jī)分為對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組8只，實(shí)驗(yàn)組52只建立大鼠肝纖維化模型，給予50％CCl4植物油混懸液皮下注射，每周2次，共計(jì)12周，首次

2、皮下注射劑量為0.5ml/100g體重，以后注射劑量為0.3ml/100g體重，分別于3周、6周、9周、12周末隨機(jī)從進(jìn)行造模的大鼠中取10只，從對(duì)照組大鼠中取2只進(jìn)行超聲造影檢查。2、超聲造影檢查記錄造影劑到達(dá)肝動(dòng)脈時(shí)間(Hepatic artery arrival time，HAAT)、造影劑到達(dá)門靜脈時(shí)間(Portal vein arrival time，PVAT)、造影劑到達(dá)肝靜脈時(shí)間(Hepatic vein arrival

3、time，HVAT)，根據(jù)造影劑在相應(yīng)血管內(nèi)開始出現(xiàn)的時(shí)間，計(jì)算造影肝動(dòng)一靜脈渡越時(shí)間(Hepatic artery to vein transmit time，HA-HVTT)，進(jìn)入CnTI程序，獲取肝實(shí)質(zhì)時(shí)間一強(qiáng)度曲線，記錄達(dá)峰值時(shí)間、峰值強(qiáng)度、曲線上升斜率、下降斜率；所有動(dòng)物模型在超聲造影檢查后心臟取血檢測(cè)肝纖維化血清學(xué)指標(biāo)；獲取肝組織以10％甲醛固定，石蠟包埋，進(jìn)行HE染色、網(wǎng)狀纖維染色，光鏡下判定肝纖維化程度。3、以病理肝纖維

4、化分期為依據(jù)進(jìn)行分組，單因素方差分析超聲造影、血清學(xué)檢查參數(shù)各組問(wèn)差異，對(duì)于組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的指標(biāo)，分別以S≥1，S=4為判定肝纖維化和早期肝硬化的標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)用ROC分析法評(píng)價(jià)其診斷肝纖維化的價(jià)值。
　　 [結(jié)果]1、造模時(shí)間與肝纖維化進(jìn)程的關(guān)系及分級(jí)情況隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng)，肝細(xì)胞變性、壞死，逐漸形成纖維間隔，肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂，最終形成假小葉，給藥3周SO期4只，S1期5只，S2期1只；給藥6周SO期2只，S1期1只，S2期

5、5只，S3期2只；給藥9周S1期1只，S2期3只，S3期4只，S4期2只；給藥12周S2期1只，S3期2只，S4期7只。2、肝纖維化進(jìn)程(分級(jí))與血清學(xué)關(guān)系隨著肝纖維化加重，HA、PCⅢ、C-Ⅳ及LN水平隨肝纖維化加重呈上升趨勢(shì)，HA、LN組間兩兩比較：對(duì)照組、S1期、S2期與S3、S4期可區(qū)分(P＜0.05)，PCⅢ、C-Ⅳ組間兩兩比較：對(duì)照組、S1期、S2期、S3期與S4期可區(qū)分(P＜0.01)。3、肝纖維化進(jìn)程(分級(jí))的超聲造影結(jié)

6、果超聲造影對(duì)照組、S1期、S2期、S3期、S4期HAAT、PVAT、達(dá)峰時(shí)間、曲線上升斜率兩兩比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，S3期、S4期HVAT、HA-HVTT較對(duì)照組、S1期、S2期縮短(P＜0.01)。肝實(shí)質(zhì)時(shí)間一強(qiáng)度曲線分析S3期、S4期峰值強(qiáng)度及曲線下降斜率較對(duì)照組、S1期、S2期降低(P＜0.01)。4、血清學(xué)指標(biāo)ROC分析結(jié)果HA、PCⅢ、C-Ⅳ、LN以S≥1為判定肝纖維化標(biāo)準(zhǔn)，ROC曲線下面積分別為0.728、0

7、.811、0.673、0.532，且曲線與機(jī)會(huì)線均相交叉，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上診斷性較差，診斷價(jià)值較?。灰許=4為判定早期肝硬化的標(biāo)準(zhǔn)，ROC曲線下面積均大于0.9，對(duì)早期肝硬化的診斷有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，準(zhǔn)確性較高。5、超聲造影指標(biāo)ROC分析結(jié)果以S≥1為判定肝纖維化標(biāo)準(zhǔn)，HVAT、峰值強(qiáng)度、下降斜率曲線下面積分別為0.726、0.746、0.724，且曲線與機(jī)會(huì)線均相交叉，在統(tǒng)計(jì)學(xué)上診斷性較差，診斷價(jià)值較小；HA-HVTT曲線下面積為0.792，且曲

8、線與機(jī)會(huì)線不相交，對(duì)肝纖維化的診斷準(zhǔn)確性中等。以S=4為判定早期肝硬化的標(biāo)準(zhǔn)，HVAT、HA-HVTT的ROC曲線下面積均大于0.9，對(duì)早期肝硬化的診斷有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，診斷準(zhǔn)確性較高；峰值強(qiáng)度、下降斜率ROC曲線下面積分別為0.828及0.852，對(duì)早期肝硬化的診斷準(zhǔn)確性中等。
　　 [結(jié)論]1、應(yīng)用CEUS可以觀察大鼠肝動(dòng)脈、門靜脈、肝靜脈顯影過(guò)程，隨肝纖維化進(jìn)程呈一定規(guī)律性變化，且變化能為肝實(shí)質(zhì)一時(shí)間強(qiáng)度曲線所反映，揭示肝纖維