Sprague-Dawley大鼠海洛因成癮易感性差異的多巴胺相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、目的：建立大鼠海洛因成癮易感性差異的條件性位置偏愛模型，對(duì)海洛因CPP易感性差異大鼠伏隔核殼區(qū)DA及其代謝產(chǎn)物濃度變化進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，探討伏隔核殼區(qū)細(xì)胞外多巴胺濃度及新奇環(huán)境反應(yīng)性與海洛因成癮易感性之間的關(guān)系。
　　 方法：152只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠分別進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)以了解其在新奇環(huán)境中的反應(yīng)性，然后隨機(jī)抽取32為生理鹽水對(duì)照組(SC)，其余120只大鼠為海洛因處理組進(jìn)行條件性位置偏愛(CPP)訓(xùn)練，海洛因

2、采取小劑量遞增性皮下注射方式，2次/日，起始劑量0.5mg/kg/次，逐日遞增0.5mg/kg/次，直至第7天時(shí)3.5mg/kg/次。海洛因處理組根據(jù)海洛因誘導(dǎo)的CPP強(qiáng)度不同再分為高CPP組(HP)和低CPP組(LP)，各占總數(shù)的30％，其中SC組8只，HP、LP組各12只行腦立體定向術(shù)，利用微透析技術(shù)在活體對(duì)大鼠成癮期(末次海洛因注射后30min)及戒斷第1、3、7、14天伏隔核殼區(qū)(shell of accumbens nucle

3、us，AcbSH)細(xì)胞外DA和DOPAC的變化進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測(cè)。微透析樣本的檢測(cè)采用庫(kù)倫陣列高效液相法。
　　 結(jié)果：1.海洛因處理前后實(shí)驗(yàn)大鼠CPP差值有顯著性差異；HP組曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)跨格總數(shù)及運(yùn)動(dòng)總距離均明顯高于LP組；各組CPP的差值均與曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果呈正相關(guān)；2.海洛因誘導(dǎo)了大鼠成癮期AcbSH區(qū)DA濃度顯著升高及代謝加快，而在戒斷早期AcbSH區(qū)DA濃度急劇下降，其中戒斷第1、3天顯著低于對(duì)照組；3.HP組在成癮期DA濃度顯著高

4、于LP組大鼠，在所有檢測(cè)時(shí)點(diǎn)HP組DOPAC及DOPAC/DA均顯著高于LP組。
　　 結(jié)論：1.小劑量遞增法可以有效的建立海洛因CPP易感性差異模型；2.新奇環(huán)境反應(yīng)性能夠較好的預(yù)測(cè)海洛因依賴的強(qiáng)度；3.海洛因暴露大鼠成癮期伏隔核殼區(qū)DA釋放及代謝顯著增加，而在戒斷早期伏隔核殼區(qū)DA濃度急劇下降，并隨著戒斷的延長(zhǎng)而逐漸恢復(fù);4.海洛因高偏愛大鼠有更高的伏隔核殼區(qū)DA系統(tǒng)反應(yīng)性，表現(xiàn)為成癮期更高的細(xì)胞外DA濃度以及戒斷后長(zhǎng)期存在

5、的DA系統(tǒng)活性升高，這可能是大鼠海洛因成癮易感性差異的神經(jīng)生化基礎(chǔ)之一。
　　 目的：觀察高、低海洛因成癮易感性大鼠中腦腹側(cè)背蓋區(qū)(ventral tegmentalarea，VTA)、伏隔核殼區(qū)、前額葉皮質(zhì)(prefrontal cortex，PFC)D2受體(dopamineD2 receptor,D2R)以及多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體(dopamine transportor,DAT)的差異及動(dòng)態(tài)變化，進(jìn)一步探討海洛因成癮易感性差異的多

6、巴胺機(jī)制。
　　 方法：利用免疫組化方法對(duì)高、低偏愛組及生理鹽水對(duì)照組大鼠分別于末次海洛因注射后30分鐘、戒斷第1、3、7、14各腦區(qū)D2R和DAT蛋白表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。
　　 結(jié)果：1.海洛因處理后大鼠各檢測(cè)腦區(qū)D2R蛋白表達(dá)顯著下降，而在戒斷后逐漸回升，但在戒斷14天后仍顯著低于對(duì)照組；2.海洛因高偏愛組大鼠在所有檢測(cè)時(shí)點(diǎn)各腦區(qū)D2R下調(diào)比低偏愛組大鼠更為明顯；3.海洛因處理后大鼠各腦區(qū)DAT蛋白表達(dá)顯著下降，戒斷后逐漸

7、回升，在戒斷7天后與對(duì)照組無顯著性差異；4.海洛因高偏愛組大鼠各腦區(qū)所有檢測(cè)時(shí)點(diǎn)DAT表達(dá)與低偏愛組大鼠均無明顯差別。
　　 結(jié)論：1.海洛因慢性處理后，大鼠各成癮相關(guān)腦區(qū)D2R出現(xiàn)持續(xù)性下調(diào)；2.不同個(gè)體D2R敏感性或受體水平存在差異，低D2R可能與海洛因成癮的高易感性與有關(guān)；3.海洛因慢性處理后，大鼠各成癮相關(guān)腦區(qū)DAT出現(xiàn)持續(xù)性下調(diào)；4.未發(fā)現(xiàn)不同易感性的大鼠DAT蛋白水平存在差異，海洛因成癮易感性與DAT的表達(dá)可能沒有直