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1、目的:觀察HANS針刺對(duì)海洛因成癮大鼠學(xué)習(xí)記憶、海馬CREB和p-CREB表達(dá)及海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響,初步探討其作用機(jī)制,為針刺戒毒提供一定的理論依據(jù)。 方法:54只Wister大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,實(shí)驗(yàn)組又分為海洛因成癮組(簡(jiǎn)稱成癮組)和海洛因成癮后自然戒斷針刺組(簡(jiǎn)稱針刺組),按劑量遞增原則,給Wister大鼠皮下注射海洛因,1日2次,連續(xù)9天,第10天用納洛酮催促戒斷,確定海洛因成癮模型的建立。對(duì)照組以同樣方式注射
2、等量生理鹽水。成癮組繼續(xù)給海洛因維持量(27mg/kg)5天,針刺組則停止給藥,給予HANS針刺(每天1次,連續(xù)5天)。三組(對(duì)照組、成癮組、針刺組)各自進(jìn)行跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)測(cè)試大鼠學(xué)習(xí)記憶,石蠟切片HE染色光鏡下觀察海馬神經(jīng)元形態(tài)及數(shù)量的變化;免疫組化法檢測(cè)各組大鼠海馬CREB、p-CREB的表達(dá),流式細(xì)胞儀檢測(cè)海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡。結(jié)果:1.建立的海洛因成癮模型組大鼠催促戒斷癥狀的評(píng)分符合海洛因成癮模型評(píng)分標(biāo)準(zhǔn),并且實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組大鼠的戒斷評(píng)分
3、有顯著性差異(P<0.01)。2.跳臺(tái)試驗(yàn)結(jié)果表明:成癮組和對(duì)照組大鼠比較,反應(yīng)時(shí)間及累積電擊時(shí)間均延長(zhǎng)(P<0.01),跳臺(tái)潛伏期縮短(P<0.01),錯(cuò)誤次數(shù)增加(P<0.01);針刺組和成癮組大鼠比較,反應(yīng)時(shí)間及累積電擊時(shí)間縮短,跳臺(tái)潛伏期延長(zhǎng),錯(cuò)誤次數(shù)減少(P<0.01)。3.免疫組化結(jié)果顯示:與對(duì)照組比較,成癮組大鼠海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)、DG區(qū)CREB、p-CREB表達(dá)增強(qiáng)(P<0.05);針刺組大鼠海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)、
4、DG區(qū)CREB、p-CREB表達(dá)顯著增強(qiáng)(P<0.01)。4.流式細(xì)胞儀結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,成癮組大鼠海馬細(xì)胞凋亡率增加(P<0.01),針刺組大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞凋亡率較成癮組降低(P<0.05)。 結(jié)論:1.海洛因成癮引起大鼠學(xué)習(xí)記憶下降;2.海洛因成癮可使大鼠海馬CA1區(qū)、CA3區(qū)、DG區(qū)CREB、p-CREB表達(dá)增強(qiáng),針刺使CREB及其磷酸化水平進(jìn)一步升高,提示p-CREB參與大鼠海馬學(xué)習(xí)記憶過(guò)程;3.海洛因成癮大鼠海馬
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