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文檔簡介
1、目的:
研究血清素與SD大鼠成骨細胞(Osteoblasts,OBs)的劑量相關性。
方法:
①貼壁培養(yǎng)與分離新生大鼠顱骨細胞。通過觀察細胞形態(tài)和熒光染色鑒定。
?、谙騊3代細胞培養(yǎng)液中混進不同濃度(10-5 mol/L、10-6 mol/L、10-7 mol/L、10-8 mol/L、10-9 mol/L、0mol/L)血清素干預。
?、鄣?天用MTT法分析干預因素與增殖的關系。
2、?、艿?0天分別用微量酶標法測堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)水平和免疫熒光法測Ⅰ型膠原蛋白(Collagen-Ⅰ,Col-Ⅰ)水平分析干預因素與分化的關系。
⑤第15天用ELISA法測骨鈣素(Osteocalcin,OCN)水平,分析干預因素與分化的關系。
統(tǒng)計學方法
通過SPSS20.0收集整理并分析數(shù)據(jù)。計量資料用均數(shù)±標準差(x±s)表示,不同組間比較采用單因素方差分析
3、,多組間兩兩之間比較采用LSD-t檢驗,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。
結果:
不同濃度(10-5 mol/L、10-6 mol/L、10-7 mol/L、10-8 mol/L、10-9 mol/L、0mol/L)血清素干預, MTT法測得平均光密度值分別為:0.400±0.028,0.379±0.023,0.379±0.047,0.401±0.038,0.420±0.038,0.618±0.064,任意組與空白
4、對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);微量酶標法測得ALP平均水平分別為:0.046±0.002,0.017±0.002,0.026±0.002,0.046±0.002,0.051±0.002,0.073±0.003,任意組與空白對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);免疫熒光法測得Col-Ⅰ平均水平分別為:45.581±6.378,33.110±1.161,23.327±0.784,15.731±2.243,27.331
5、±2.430,33.592±2.684,除10-6 mol/L組外任意組與空白對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);ELISA法測得 OCN平均水平分別為:3.002±1.639,1.711±0.370,2.193±0.551,2.439±1.469,2.703±1.175,8.021±3.036,任意組與空白對照組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
結論:
血清素對成骨細胞成負性效應,這種負效應與血清
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