鹽酸右美托咪定預(yù)處理對(duì)大鼠肝臟缺血再灌注損傷的影響.pdf

1、背景:肝癌切除術(shù)、肝移植術(shù)、創(chuàng)傷失血性休克等常不可避免地發(fā)生肝臟缺血再灌注損傷，嚴(yán)重者可導(dǎo)致肝功能衰竭、移植器官無(wú)功能和多器官功能障礙綜合征。大量研究旨在探討肝臟缺血再灌注損傷的機(jī)制，其中炎性反應(yīng)起著至關(guān)重要的作用，而最新的研究機(jī)制表明，免疫系統(tǒng)的固有免疫應(yīng)答也導(dǎo)致了肝損傷。傷害性因素下，中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞被激活和增殖，Kupffer細(xì)胞產(chǎn)生炎性因子，誘導(dǎo)活性氧產(chǎn)生，誘發(fā)細(xì)胞凋亡或壞死。免疫炎癥反應(yīng)攻擊和殺傷受應(yīng)激的細(xì)胞，而加重組織損

2、傷。
　　 右美托咪定為高效、高選擇性的α2腎上腺素受體激動(dòng)劑，具有鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛和抗交感、抗焦慮、無(wú)呼吸抑制、血流動(dòng)力學(xué)更加平穩(wěn)等作用。近年來(lái)，已經(jīng)廣泛用于臨床多個(gè)領(lǐng)域，其器官保護(hù)和對(duì)免疫炎癥反應(yīng)的影響成為新的研究方向。右美托咪定可通過(guò)中樞和外周機(jī)制，抑制創(chuàng)傷產(chǎn)生的脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)及應(yīng)激反應(yīng)，減輕傷害性刺激引起的免疫炎癥反應(yīng)中促炎性細(xì)胞因子的生成，減弱臟器缺血再灌注中細(xì)胞凋亡和死亡，對(duì)心、腦、肺腎有保護(hù)作用。研究發(fā)現(xiàn)，右美托咪定減輕

3、膿毒血癥時(shí)肝組織的損傷，而其對(duì)圍術(shù)期肝臟缺血再灌注損傷的影響尚無(wú)論斷。本文通過(guò)建立大鼠肝臟缺血再灌注模型，觀察血清ALT、AST、LDH、TNF-α、IL-1β和肝臟組織細(xì)胞凋亡的變化，來(lái)研究右美托咪定預(yù)處理對(duì)肝臟缺血再灌注損傷的影響。
　　 目的:探討右美托咪定預(yù)處理對(duì)大鼠肝細(xì)胞缺血再灌注損傷的影響，為右美托咪定的臨床應(yīng)用提供新的理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:雄性健康Wistar大鼠27只，隨機(jī)分成3組，假手術(shù)組(Sh

4、am組);肝臟缺血再灌注組（I/R組）;右美托咪定預(yù)處理組(Dex組)，每組9只。
　　 術(shù)前禁食12h，不禁水。腹腔注射1％戊巴比妥鈉（40mg/kg）麻醉，頸動(dòng)脈置管。術(shù)前30minDex組腹腔注射右美托咪定100ug/kg（右美托咪定濃度10ug/ml）;Sham組和I/R組腹腔注射等容量的0.9％Nacl，實(shí)施手術(shù):
　　 Sham組:只游離肝門(mén)，不阻斷肝葉供血;
　　 I/R組與Dex組:阻斷肝左葉及中

5、葉的門(mén)靜脈和肝動(dòng)脈分支，使70％肝臟缺血，30min后，恢復(fù)肝左葉和中葉灌注。
　　 三組分別于缺血前(T1)，再灌注30min(T2)，再灌注120min(T3)時(shí)頸動(dòng)脈取血1ml，離心提取血清，全自動(dòng)生化分析儀測(cè)定血清ALT、AST、LDH含量，雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(EuzymelinkedImmunosorbentAssay，ELISA)測(cè)定血清TNF-a、IL1-β含量。肉眼觀察再灌注120min時(shí)肝臟組織充血情況，再灌

6、注120min后，處死大鼠，取缺血再灌注部位肝臟組織，流式細(xì)胞分析技術(shù)(FlowCytometry，F(xiàn)CM)檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。
　　 結(jié)果:1三組大鼠體重、月齡、手術(shù)時(shí)間、出血量及補(bǔ)液量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 2.肉眼觀察肝臟形態(tài)學(xué)變化
　　 T3時(shí)，Sham組肝臟組織表面光滑，顏色紅潤(rùn)，大小正常;I/R組再灌注后肝臟組織明顯充血，顏色深紅，腫大;Dex組再灌注后肝臟紅腫，組織充血，程度較I/R

7、組輕。
　　 3.組間比較
　　 T1:各組血清ALT、AST、LDH、TNF-α和IL-1β無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　 T2:于Sham組比較，I/R組血清ALT、AST、LDH、TNF-α和IL-1β升高(P＜0.05)，Dex組血清ALT、AST、TNF-α和IL-1β升高(P＜0.05);Dex組血清LDH與Sham組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);于I/R組比較，Dex組血清ALT、AS

8、T、LDH、TNF-α和IL-1β降低(P＜0.05)。
　　 T3:于Sham組比較，I/R組血清ALT、AST、LDH、TNF-α、IL-1β和細(xì)胞凋亡指數(shù)升高(P＜0.05)，Dex組血清ALT、AST、TNF-α、IL-1β和細(xì)胞凋亡指數(shù)升高(P＜0.05)，Dex組血清LDH與Sham組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);于I/R組比較，Dex組血清ALT、AST、LDH、TNF-α、IL-1β和細(xì)胞凋亡指數(shù)降低(

9、P＜0.05)。
　　 4.組內(nèi)比較
　　 Sham組:T1、T2和T3，血清ALT、AST、LDH、TNF-α和IL-1β差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 I/R組:于T1比較，T2和T3兩時(shí)間點(diǎn)，血清ALT、AST、LDH、TNF-α和IL-1β升高(P＜0.05);T2和T3比較，血清ALT、AST、LDH、TNF-α和IL-1β差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 Dex組:于T1比較