藥用甘薯西蒙一號(hào)的組織培養(yǎng)、毛狀根誘導(dǎo)及其莖葉多糖降血糖作用的研究.pdf

1、西蒙一號(hào)藥用甘薯,是巴西聯(lián)邦國(guó)立農(nóng)科大學(xué)鄭西蒙教授選育的品種[1,2]。1973年由日本醫(yī)學(xué)博士楊天和引入日本,1982年引進(jìn)入我國(guó)[3]。
　　西蒙一號(hào)是一種十分珍貴的藥物植物資源,經(jīng)多家醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)研究、證明它對(duì)治療血小板減小癥、糖尿病及抗腫瘤有較好的療效,并可增強(qiáng)人體免疫功能[4-8]。
　　西蒙一號(hào)引入我國(guó)以來,由于栽培條件的改變,長(zhǎng)期無性繁殖病毒危害,造成該品種種性退化嚴(yán)重,其產(chǎn)量逐年下降,給生產(chǎn)上應(yīng)用和作為保健藥

2、物品開發(fā)利用帶來嚴(yán)重影響。為了在我國(guó)綜合開發(fā)利用甘薯西蒙一號(hào),本文進(jìn)行了甘薯西蒙一號(hào)的組織培養(yǎng)研究,毛狀根的誘導(dǎo),并對(duì)甘薯多糖降血糖動(dòng)物實(shí)驗(yàn)進(jìn)行了初步研究。通過研究得出結(jié)果如下:
　　1.以MS為基本培養(yǎng)基,運(yùn)用正交設(shè)計(jì)方法,利用植物組織、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),成功地建立了甘薯西蒙一號(hào)的組織培養(yǎng)快繁技術(shù)體系。研究出甘薯西蒙一號(hào)的最佳快繁培養(yǎng)基為:MS+0.3mg·L-1NAA+0.2mg·L-16-BA+40g·L-1蔗糖;最佳生根培養(yǎng)基

3、為:1/2MS+1.0mg/lNAA。
　　2.利用發(fā)根農(nóng)桿菌A4分別感染藥用甘薯西蒙一號(hào)的葉片、莖切段、葉柄等外植體,誘導(dǎo)出毛狀根,并對(duì)毛狀根進(jìn)行了離體培養(yǎng)。采用L9(34)正交設(shè)計(jì)法優(yōu)化甘薯西蒙一號(hào)的毛狀根誘導(dǎo)條件;PCR擴(kuò)增檢測(cè)轉(zhuǎn)化毛狀根;HPLC檢測(cè)毛狀根中咖啡酸的含量。結(jié)果表明:轉(zhuǎn)化中莖切段是最合適的外植體,最佳感染時(shí)間20min,共培養(yǎng)最佳時(shí)間為2d;PCR擴(kuò)增檢測(cè)表明發(fā)根農(nóng)桿菌 Ri質(zhì)粒的T-DNA片段已整合進(jìn)植物的