2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩78頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、研究目的: 篩選抗癌扶正方有效抗肝癌的藥效簡方。體內(nèi)外評價抗癌扶正方及拆方抗癌與扶正兩類藥物組的抗肝癌活性,篩選其抗肝癌功效的主要藥物及有效成分,精簡臨床有效驗(yàn)方。 研究方法: 建立肝癌小鼠H22腹水移植瘤模型,并隨機(jī)分為模型組,5-FU陽性對照組,抗癌扶正方高、中、低劑量組,抗癌方高、中、低劑量組及扶正方高、中、低劑量組。接種次日開始,每日按組分別予全方高、中、低劑量、抗癌方和扶正方高、中、低劑量水煎液灌胃。配

2、制的抗癌扶正方及據(jù)功效拆分抗癌方和扶正方藥物溶液劑量如下:ALC全方依次為0.92g/ml、0.46g/ml、0.23 g/ml;抗癌方依次為0.58g/ml、0.29g/ml、0.15g/ml;扶正方依次為0.32g/ml、0.16g/ml、0.08g/ml,每只小鼠每日0.4ml灌胃。模型組小鼠每日0.4ml生理鹽水灌胃;5-FU陽性對照組小鼠按182mg/kg劑量,每日0.4ml灌胃。給藥7日后處死小鼠,剝離腫瘤和脾臟并稱重,計(jì)算

3、各組藥物的抑瘤率和小鼠脾指數(shù)。將各組小鼠實(shí)體瘤標(biāo)本包埋、切片并HE染色,顯微鏡鏡下比較壞死面積百分率。ELISA法檢測小鼠肝癌實(shí)體瘤組織中細(xì)胞壞死因子TNF-α水平和端粒酶活性。體外研究以氟尿嘧啶5-FU陽性對照,抗癌扶正方以及拆方的抗癌方和扶正方為實(shí)驗(yàn)組,三方均設(shè)1μg/ml、10μg/ml、100μg/ml、1mg/ml、10mg/ml、100mg/ml六個劑量組,采用MTT噻唑氮藍(lán)比色法觀察各組不同劑量的藥物對人肝癌細(xì)胞SMMC-

4、7721增殖的影響;篩選MTT有效劑量的藥物作用細(xì)胞24小時后,以Hoechst33258熒光染色,熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化;采用流式細(xì)胞儀FCM檢測藥物作用后的細(xì)胞凋亡情況及細(xì)胞周期分布,以及對肝癌細(xì)胞SMMC-7721中p53、bcl-2凋亡調(diào)控基因蛋白表達(dá)的影響。 研究結(jié)果: 抗癌扶正方ALC及拆方對小鼠H22肝癌均有一定抑制,各劑量組小鼠肝癌瘤重均明顯小于模型組(p<0.01)。ALC高劑量組抑瘤率達(dá)

5、76.73%,中劑量組抑瘤率與5-FU陽性對照組無顯著差異(P>0.05)??拱┓降囊至鲎饔门cALC全方相當(dāng)(P>0.05),明顯強(qiáng)于扶正方(p<0.05)??拱┓稣揭约翱拱┓健⒎稣骄商岣咝∈笃⒅笖?shù),明顯高于5-FU組(p<0.05),與正??瞻捉M小鼠水平接近(p>0.05)。用藥組小鼠肝癌瘤組織HE染色后,鏡下均可見不同面積的壞死灶,其中抗癌方高劑量組壞死面積最大。ELISA法測小鼠肝癌實(shí)體瘤TNF-α水平和端粒酶活性的結(jié)果顯示

6、:抗癌扶正方及拆方組小鼠肝癌TNF-α水平較模型組小鼠有顯著提高(p<0.05);端粒酶活性較模型組,則顯著下降(p<0.05)。體外實(shí)驗(yàn)中,抗癌扶正方全方及抗癌方組藥物的MTT結(jié)果顯示:100μg/ml劑量對人肝癌細(xì)胞SMMC-7721生長于加藥后24小時均有明顯抑制(p<0.01),組間差異無顯著性(p>0.05),而100μg/ml48小時組的細(xì)胞抑制率與24小時組相比,未有明顯提高。10mg/ml劑量組扶正方對細(xì)胞的抑制顯著(p

7、<0.01),但較ALC全方及抗癌方,均差異顯著(p<0.01)。抗癌方中莪術(shù)油組分24小時10mg/ml劑量的抑制率,顯著高于同劑量的全方當(dāng)歸+莪術(shù)油以及扶正當(dāng)歸油組(p<0.01);而抗癌方多糖組抑制率較扶正方多糖組,有明顯提高(p<0.01)。合用抗癌方中莪術(shù)油和抗癌方中多糖組分后,抑制率均高于單用莪術(shù)油和單用多糖組,差異均有顯著性(p<0.01)。熒光顯微鏡下可見經(jīng)Hoechst33258染色的各組用藥組肝癌細(xì)胞,均出現(xiàn)少量核固

8、縮或核碎裂,ALC及拆方的高劑量組出現(xiàn)典型凋亡小體。流式細(xì)胞儀FCM分析抗癌扶正方及拆方作用24小時的肝癌細(xì)胞,DNA直方圖顯示1mg/ml藥物作用下即出現(xiàn)明顯“亞G1峰”,即凋亡峰Ap,且凋亡量效關(guān)系明顯(p<0.01)。其中抗癌方1mg/ml凋亡率與全方接近,10mg/ml顯著大于全方(p<0.01)。細(xì)胞周期顯示:較于空白對照組,G0/G1期比例相對增加,S期及G2/M期比例相對下降,細(xì)胞周期被阻滯于G0/G1期。ALC作用細(xì)胞2

9、4小時,流式細(xì)胞儀FCM檢測凋亡調(diào)控基因蛋白表達(dá)的結(jié)果表明:隨著ALC及拆方用藥濃度增加,肝癌細(xì)胞SMMC-7721中mtp53和bcl-2蛋白表達(dá)均不同程度的減弱。其中全方組與抗癌方、扶正方表達(dá)的RFI差異并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p>0.05)。 研究結(jié)論: 抗癌扶正方及拆方均能夠明顯抑制小鼠肝癌H22移植瘤的生長,其中抗癌方與全方效果接近,可能是體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,ALC全方抗肝癌的主要功效簡方??拱┓稣郊安鸱骄芴岣咝∈髾C(jī)體免疫

10、水平,且不同程度的抑制了小鼠肝癌端粒酶活性、提高肝癌組織中TNF-α水平??拱┓稣郊安鸱接行Э垢伟C(jī)制,可能與其提高機(jī)體免疫水平,抑制肝癌細(xì)胞端粒酶活性以及提高肝癌組織TNF-α水平有關(guān)。抗癌扶正方及拆方在體外亦能明顯抑制人肝癌細(xì)胞SMMC-7721的增殖,誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡及阻滯細(xì)胞周期于G0/G1期。其中,抗癌方的抑制效果與全方接近,優(yōu)于扶正方。抗癌扶正方ALC抑制肝癌細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)其凋亡的機(jī)制,可能與其阻滯細(xì)胞周期,下調(diào)細(xì)胞中mt

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論