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文檔簡介
1、多糖和硒對許多疾病都有防治作用,近年來對多糖和硒的活性的研究已經(jīng)較為深入,但將多糖與硒有機結合成為硒多糖,在國內(nèi)外的研究尚處于起步階段。靈芝硒多糖是一種通過生物轉化作用得到的半天然、半人工合成的富硒真菌多糖,硒多糖的化學結構有別于普通多糖,形成了特殊的硒氧鍵;硒多糖具有多種生理活性,具有可拮抗重金屬中毒和抗活性氧損傷的能力,從而發(fā)揮其抗氧化作用;影響細胞周期,使癌細胞DNA合成受阻而抑制癌細胞生長;并能夠誘導腫瘤細胞凋亡過程的發(fā)生等。
2、 本論文通過食用菌深層發(fā)酵方法,向靈芝發(fā)酵菌絲體發(fā)酵液中加入了無機硒—亞硒酸鈉,經(jīng)深層發(fā)酵后,有效的將無機硒轉化成有機硒并富集于靈芝菌絲體中,熱水、堿水浸提得到靈芝硒多糖粗提物。后經(jīng)去蛋白、脫色、DEAE-cellulose柱層析、高效液相色譜柱層析等步驟,將靈芝粗多糖純化為10種組分,MTT實驗表明,多糖組分SeGLP-2B-1對K562癌細胞抑制率最高。 本論文的著重點是通過對純化的各多糖組分化學結構的比較,通過分析不
3、同生物活性多糖物質在其化學結構上的差異,從而從化學結構比較的角度為硒多糖的高效生物活性找到證據(jù)。本實驗的研究對象是富硒多糖SeGLP-2B-1、SeGLP-2B-2和不富硒的靈芝多糖GLP-2B-1、GLP-2B-2,利用紅外光譜、紫外光譜、氣相色譜、質譜和核磁共振等儀器同步進行結構分析,以求闡明它們在結構上的差異。高效液相色譜法測定了硒多糖SeGLLP-2B-1和SeGLLP-2B-2的分子量分別為1.06×106D和1.42×104
4、D。 紅外光譜分析表明硒多糖中的Se元素可能是以Se=O鍵或C-O-SeO3鍵的形式存在。靈芝多糖糖環(huán)上的某些部位甲基化具有普遍性,而硒多糖的糖環(huán)上的這種甲基化不明顯。 紫外光譜掃描結果顯示硒多糖在260nm和280nm兩處均無明顯吸收,說明純化后的硒多糖已不含核酸和蛋白質。 氣相色譜分析表明GLP-2B-1和SeGLP-2B-1都含有Glc,Xyl,Rha,Gal四種單糖,摩爾比分別為1.000∶0.927∶0
5、.651∶0.263和1.000∶0.652∶0.443∶0.227;GLP-2B-2和SeGLP-2B-2都含有Glc,Gal,Xyl,Man,Rha五種單糖,摩爾比分別為1.000∶1.015∶0.584∶0.333∶0.260和1.000∶0.840∶0.623∶0.601∶0.193。 甲基化單糖的質譜解析和核磁共振的峰譜指派分析綜合看來,GLP-2B-1中的糖苷鍵有α-Glc(1→6),α-Gal(1→6),α-Rha
6、(1→4)和β-Xyl(1→4)四種類型;SeGLP-2B-1中的糖苷鍵有α-Glc(1→6),α-Gal(1→6),α-Rha(1→4),β-Xyl(1→4)β-Gal(1→3)和α-Glc(1→4)六種類型;GLP-2B-2中的糖苷鍵有α-Glc(1→6),α-Glc(1→4),β-Gal(1→3),α-Rha(1→4),β-Xyl(1→4),α-Gal(1→6)和α-Man(1→4)七種類型;SeGLP-2B-2中的糖苷鍵有α-G
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