干擾素誘導(dǎo)蛋白16對(duì)人血管外膜成纖維細(xì)胞增殖與遷移的影響及其機(jī)制.pdf

1、目的：研究干擾素誘導(dǎo)蛋白16（interferon-inducible protein16，IFI16）對(duì)人腦血管外膜成纖維細(xì)胞（human brain vascular adventitial fibroblasts，HBVAF）增殖與遷移的影響及其可能機(jī)制，為該蛋白在血管增殖性疾病中的運(yùn)用提供更多的理論依據(jù)。
　　方法：培養(yǎng)HBVAF細(xì)胞，設(shè)未干預(yù)組、干擾素α（interferon alpha，IFN-α）干預(yù)組(用終濃度為2

2、000kU/L~5000kU/L的IFN-α刺激細(xì)胞24h)。蛋白免疫印跡（western blotting）法分別測(cè)定各組細(xì)胞中 IFI16蛋白表達(dá)水平。在 HBVAF細(xì)胞中轉(zhuǎn)染針對(duì)IFI16基因的小分子干擾 RNA(small interference RNA，siRNA)48 h后,用終濃度為2000 kU/L的IFN-α干預(yù)細(xì)胞24 h。同時(shí)以與IFI16基因無(wú)關(guān)的Control siRNA作為陰性對(duì)照。實(shí)驗(yàn)設(shè)空白組、Contr

3、ol siRNA組、IFI16 siRNA組、IFN-α組、IFN-α+Control siRNA組、IFN-α+IFI16 siRNA組。流式細(xì)胞儀測(cè)定細(xì)胞周期，細(xì)胞劃線法與 transwell法測(cè)定細(xì)胞遷移能力。應(yīng)用real-time PCR法和western blotting法分別測(cè)定細(xì)胞中IFI16、p53及p21 mRNA和蛋白表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果：與未干預(yù)組比較，IFN-α（2000kU/L~5000kU/L）干

4、預(yù) HBVAF后，IFI16蛋白表達(dá)水平明顯上調(diào)（P<0.05)，但不同濃度 IFN-α組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。然而與空白組比較，轉(zhuǎn)染針對(duì)IFI16 siRNA后，HBVAF中IFI16、p53及p21 mRNA和蛋白表達(dá)水平下調(diào)，增加了細(xì)胞G1/S期轉(zhuǎn)換。IFN-α可誘導(dǎo)HBVAF中IFI16、p53及p21 mRNA和蛋白表達(dá)水平上調(diào)，同時(shí)抑制細(xì)胞G1/S期轉(zhuǎn)換與細(xì)胞遷移，但在轉(zhuǎn)染了IFI16 siRNA的HBVAF中IFN-α的上述作