B-類清道夫受體和C-型凝集素在日本囊對(duì)蝦先天免疫中的功能研究.pdf

1、模式識(shí)別受體（PRRs）在先天免疫中起著不可替代的作用，通過(guò)識(shí)別各種“自己”和“非己”成分，把這種信息傳導(dǎo)給下游的效應(yīng)分子，有的模式識(shí)別受體可以直接發(fā)揮功能，清除異己成分。清道夫受體(SRs)和C-型凝集素(CTLs)都是模式識(shí)別受體中非常重要的成員，本研究選取日本囊對(duì)蝦(Marsupenaeusjaponicus)為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，研究了一種B類清道夫受體MjSR-B1和一個(gè)含有卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域的C-型凝集素MjcLec在先天免疫中的作用。<

2、br>　　1.日本囊對(duì)蝦B類清道夫受體MjSR-B1的功能研究
　　清道夫受體通過(guò)識(shí)別病原相關(guān)分子模式(PAMPs)參與先天免疫，同時(shí)通過(guò)識(shí)別損傷相關(guān)分子模式（DAMPs）參與疾病的發(fā)生。雖然在脊椎動(dòng)物中清道夫受體已經(jīng)得到深入研究，但是它們?cè)跓o(wú)脊椎動(dòng)物先天免疫中的作用仍需要進(jìn)一步闡明。我們從日本囊對(duì)蝦中鑒定出一種B類清道夫受體，命名為MjSR-B1。MjSR-B1主要分布在血細(xì)胞、心臟、肝胰腺中，在受到鰻弧菌和金黃色葡萄球菌刺激以

3、后，對(duì)蝦血細(xì)胞中的MjSR-B1的mRNA表達(dá)水平上調(diào)。MjSR-B1胞外結(jié)構(gòu)域的重組蛋白rMjSR-B1可以凝集革蘭氏陽(yáng)性菌和革蘭氏陰性菌，凝集作用依賴于鈣離子，同時(shí)rMjSR-B1可以結(jié)合脂多糖和脂磷壁酸。RNA干擾敲降MjSR-B1以后，日本囊對(duì)蝦對(duì)鰻弧菌和金黃色葡萄球菌的清除作用和吞噬作用都顯著下降，幾個(gè)吞噬相關(guān)基因的表達(dá)水平也下調(diào)，包括肌球蛋白Myosin，小GTP酶Rab5(Ras related protein)，溶酶體相

4、關(guān)膜蛋白Lampl(Lysosomal-associatedmembrane protein1)和肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白Arp(Actin-related protein)。同時(shí)抗菌肽的表達(dá)水平也下調(diào)，包括甲殼肽和抗脂多糖因子。過(guò)表達(dá)MjSR-B1以后，細(xì)菌清除能力增強(qiáng)，吞噬率上升，吞噬相關(guān)基因和抗菌肽的表達(dá)量都上調(diào)。然而，過(guò)表達(dá)缺少碳末端胞內(nèi)片段的突變體MjSR-B1ΔC卻沒(méi)有上述結(jié)果。我們的結(jié)果表明，MjSR-B1可以通過(guò)促進(jìn)吞噬和增強(qiáng)抗

5、菌肽的表達(dá)參與對(duì)蝦的抗細(xì)菌免疫。
　　2.含有螺旋卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域的C-型凝集素MjcLec參與日本囊對(duì)蝦的先天免疫
　　C-型凝集素家族是一類模式識(shí)別受體，在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮著重要的作用，然而它在無(wú)脊椎動(dòng)物先天免疫中的作用還需要進(jìn)一步研究。我們從日本囊對(duì)蝦中鑒定出一種新型的C-型凝集素，命名為MjcLec。MjcLec包括一個(gè)信號(hào)肽、一個(gè)螺旋卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域和一個(gè)糖識(shí)別結(jié)構(gòu)域。組織分布實(shí)驗(yàn)顯示MjcLec在所有組織中都有表達(dá)，W