卟啉類光敏抗腫瘤化合物評價.pdf

1、癌癥是世界性的難題。治療癌癥的手段除了常規(guī)的手術(shù)切除、放射治療和化學(xué)治療外,光動力學(xué)療法(Photodynamic Therapy,PDT)是一種新興的能夠治療癌癥的方法。它利用光敏劑在腫瘤組織選擇性濃集和/或滯留的特點,在有氧氣存在的情況下,通過適當(dāng)波長光的激發(fā)產(chǎn)生單線態(tài)氧等生物活性物質(zhì)而殺傷腫瘤細(xì)胞。光動力學(xué)治療的核心是光敏劑。鑒于新型光敏化合物研究的緊迫性,本實驗室自行合成了2個全新體系的光敏類抗腫瘤化合物A(1-8)、B(1-6

2、)及光敏化合物X,并且以肝癌細(xì)胞HepG2和兩種胃癌細(xì)胞MGC803和HGC27細(xì)胞為實驗?zāi)０?對這些化合物介導(dǎo)的PDT治療肝癌和胃癌的情況作了系統(tǒng)的實驗研究,目的是篩選出有效的光敏類抗腫瘤藥物。實驗分為4組,空白對照組(不給藥無光照)、單純化合物組(給藥無光照)、單純光照組(不給藥且光照)及化合物+光照組(給藥且光照,也即PDT組)。我們采用photobleaching法研究了化合物對于光照射的穩(wěn)定性；通過熒光顯微鏡觀察了各化合物是否

3、能夠進(jìn)入腫瘤細(xì)胞內(nèi),并且對進(jìn)入腫瘤細(xì)胞內(nèi)的化合物測定了其吸收量；基于MTT和CCK-8染色法檢測了PDT后腫瘤細(xì)胞的存活率；通過共聚焦激光顯微鏡(LSCM)觀察了進(jìn)入腫瘤細(xì)胞內(nèi)的各化合物在細(xì)胞內(nèi)的亞細(xì)胞定位(線粒體或者溶酶體)。
　　 Photobleaching實驗結(jié)果表明,化合物A(1-8)、B(1-6)及化合物X在激光照射40min后在最大吸收波長處吸光度值略有下降,基本保持不變,顯示這兩類體系均有很好的光穩(wěn)定性。第一章實

4、驗結(jié)果表明,A系列八個化合物中A1-A3能夠進(jìn)入HepG2細(xì)胞內(nèi),A1-A4可以進(jìn)入BGC823細(xì)胞內(nèi),且均定位于細(xì)胞的溶酶體內(nèi),剩余化合物未能進(jìn)入兩種細(xì)胞內(nèi)。MTT結(jié)果表明,在650nm激光照射下,進(jìn)入HepG2和BGC823的細(xì)胞化合物能夠產(chǎn)生顯著的PDT效應(yīng)；PDT效應(yīng)最強的化合物是A1,且它在兩種細(xì)胞的吸收量均較其它化合物高,這表明化合物A1強的PDT作用與它在細(xì)胞高的吸收量有關(guān)；未能進(jìn)入兩種細(xì)胞的化合物不能產(chǎn)生PDT治療作用。

5、無激光照射時,除了A7和A8對BGC823細(xì)胞有暗毒性,剩余化合物均對兩種細(xì)胞無暗毒性。篩選出來的藥效最強的化合物A1對另外兩種胃癌細(xì)胞HGC27和MGC803也具有顯著的PDT治療作用,且對二者細(xì)胞基本無暗毒性；化合物A1在HGC27和MGC803細(xì)胞的吸收量相近,且定位于兩種細(xì)胞溶酶體內(nèi)。
　　 第二章實驗結(jié)果表明,化合物B(1-6)均能夠進(jìn)入MGC803、HGC27和HepG2細(xì)胞內(nèi),且均定位于三種細(xì)胞溶酶體內(nèi)。MTT結(jié)果

6、表明,在有光照時,化合物B(1-6)均能夠?qū)GC27和HepG2細(xì)胞產(chǎn)生顯著的PDT效應(yīng),而只有化合物B5和B6對MGC803細(xì)胞能產(chǎn)生PDT效應(yīng)。細(xì)胞光毒性實驗表明該六種化合物的PDT效應(yīng)強弱順序大概為5、6最強,1、2次之,3、4最弱。在沒有光照時,化合物B(1-6)對三種腫瘤細(xì)胞均無暗毒性。細(xì)胞吞噬量測定結(jié)果表明,藥效最強的B5、B6吸收量最少,藥效最差的B3、B4吸收量最多,B1、B2吸收量居中；而對于單一化合物而言細(xì)胞吞噬量