PPARγ激動(dòng)劑對(duì)小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:過氧化物酶體增殖物激活受體γ（peroxisome proliferator-activated receptor gamma，PPARγ）是一種能夠調(diào)節(jié)多種炎性介質(zhì)表達(dá)的核轉(zhuǎn)錄因子，激活后對(duì)于腦外器官的缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。我們的實(shí)驗(yàn)觀察PPARγ激動(dòng)劑是否對(duì)小鼠局灶性腦缺血再灌注損傷具有保護(hù)的作用，并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行初步探討。 方法:制作小鼠大腦中動(dòng)脈阻塞再灌注模型（MCAO/R），缺血前1h給予PPARγ激動(dòng)劑羅格

2、列酮（Rosiglitazone）干預(yù)，依據(jù)干預(yù)劑量的不同，隨機(jī)分為0mg/kg（對(duì)照組）、3mg/kg組、6mg/kg組以及12mg/kg組，每組10只。分別采用3%氯化三苯四唑（2，3，5-triphenyltetrazolium，TTC）染色法、神經(jīng)功能缺損評(píng)分法，觀察PPARγ激動(dòng)劑羅格列酮對(duì)小鼠腦梗死體積及行為學(xué)的影響，初步篩查最適干預(yù)劑量。然后應(yīng)用該劑量對(duì)MCAO/R模型進(jìn)行不同時(shí)間點(diǎn)干預(yù)，依據(jù)不同干預(yù)時(shí)間點(diǎn)，即缺血前1h、

3、缺血同時(shí)、缺血后1h、缺血后2h以及缺血后3h，隨機(jī)分組。采用TTC染色法檢測(cè)各組小鼠腦梗死體積；Zea-Longa評(píng)分法對(duì)各組小鼠進(jìn)行動(dòng)物行為學(xué)評(píng)估；紫外分光光度法檢測(cè)腦組織髓過氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）活性；RT-PCR檢測(cè)炎性因子（ICAM-1、IL-1β、COX-2）mRNA表達(dá)水平；免疫組化、Western-blot法觀察上述炎性因子蛋白表達(dá)變化。 結(jié)果:（1）與腦梗死對(duì)照組相比，PPARγ激動(dòng)

4、劑羅格列酮3mg/kg干預(yù)組、6mg/kg干預(yù)組以及12mg/kg干預(yù)組小鼠腦梗死體積明顯減?。‵=65.551，P<0.01）；行為學(xué)評(píng)分顯示，與腦梗死對(duì)照組相比，PPARγ激動(dòng)劑羅格列酮3mg/kg干預(yù)組、6mg/kg干預(yù)組以及12mg/kg干預(yù)組小鼠運(yùn)動(dòng)評(píng)分明顯減少（F=6.451，P<0.01）。其中羅格列酮6mg/kg干預(yù)組、12mg/kg干預(yù)組腦梗死體積及行為學(xué)評(píng)分作用優(yōu)于3mg/kg干預(yù)組，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05），

5、而6mg/kg干預(yù)組和12mg/kg干預(yù)組兩組之間未顯示明顯差異（P>0.05）；（2）選取6mg/kg劑量，以不同時(shí)間點(diǎn)分組給藥干預(yù)（其中A組為對(duì)照組、B組為缺血前1h給藥組、C組為缺血同時(shí)給藥組、D組為缺血后1h給藥組、E組為缺血后2h給藥組、F組為缺血后3h給藥組），結(jié)果顯示：①腦梗死體積：與A組相比，B組和C組均能夠顯著降低小鼠腦梗死體積（F=23.407，P<0.01），D、E、F組則均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；②行為學(xué)評(píng)分：與A組相比，

6、B組和C組均能夠顯著降低小鼠行為學(xué)評(píng)分（F=8.355，P<0.01），D、E、F組則均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；③MPO值：與A組相比，B組和C組小鼠缺血腦組織MPO活性明顯降低（F=20.907，P<0.01），D、E、F組均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；④炎性因子ICAM-1、IL-1β和COX-2 mRNA表達(dá)：與A組相比，B組和C組缺血腦組織上述炎性因子基因表達(dá)水平均顯著降低（F值分別為15.907、12.354、16.282，P<0.01），而D、E、

7、F組均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；⑤炎性因子ICAM-1、IL-1β和COX-2蛋白表達(dá)水平：與A組相比，B組和C組缺血腦組織上述炎性因子蛋白表達(dá)水平均顯著降低（F值分別為33.561、22.304、19.207，P<0.01），而D、E、F組均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)論:（1）PPARγ激動(dòng)劑對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。（2）PPARγ激動(dòng)劑對(duì)小鼠腦缺血再灌注損傷的保護(hù)機(jī)制與抑制缺血腦組織的炎癥反應(yīng)有關(guān)。（3）PPARγ激動(dòng)劑應(yīng)在腦缺血再