視蛋白基因3（OPN3）對人肺癌A549細胞紫杉醇耐藥性作用機制的初步研究.pdf

1、肺癌是最常見的惡性腫瘤之一，嚴重危害人類健康，以非小細胞肺癌多見，而化學治療是其主要的治療手段。但隨著化療藥物的廣泛使用，腫瘤耐藥性也不斷出現(xiàn)，嚴重影響了治療效果。耐藥性是由基因決定的，因此，發(fā)現(xiàn)和研究腫瘤耐藥性相關(guān)基因及其作用的分子機制，有助于進行針對性的臨床治療，為研究新的藥物作用靶點和治療方法提供依據(jù)，其已成為當前腫瘤防治研究的重點課題。 本室前期研究表明，與淡色庫蚊對殺蟲劑抗性相關(guān)視蛋白基因高度同源的人視蛋白基因3(Op

2、sin3,OPN3)與人肺癌A549細胞紫杉醇耐藥性相關(guān)，推測其可能作為G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)成員。參與了肺癌A549細胞對紫杉醇的耐藥機制。 本研究采用G蛋白偶聯(lián)受體信號通路基因芯片，對A549紫杉醇敏感細胞轉(zhuǎn)染伽及其空載體對照組、A549PTX紫杉醇耐藥細胞干涉OPN3及其空載體對照組共4種細胞系，紫杉醇處理前后2種狀態(tài)，共8組樣品進行高通量篩選，以研究OPN3對其他G蛋白偶聯(lián)受體及GPCR下游信號通路的影響；采用定量P

3、CR及Western Blot驗證目的基因及蛋白質(zhì)表達差異，研究其對A549細胞紫杉醇耐藥影響的可能機制。結(jié)果表明，OPN3可以抑制c-Jun表達，從而降低下游基因轉(zhuǎn)錄、抑制細胞增殖，增加腫瘤細胞對藥物的敏感性。 同時，本研究采用使用annexin V/propidium iodide(PI)雙染，流式細胞儀結(jié)合熒光顯微鏡對芯片實驗樣本細胞進行凋亡檢測。結(jié)果表明，OPN3相對表達水平與A549細胞在紫杉醇處理下的凋亡水平正相關(guān)，