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1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文Pin1蛋白在紫杉醇所致A549細(xì)胞凋亡中的作用的研究姓名:曹啟軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師:陳元20080501華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文2Pin1蛋白在紫杉醇所致肺腺癌蛋白在紫杉醇所致肺腺癌A549細(xì)胞細(xì)胞凋亡中的作用的研究凋亡中的作用的研究研究生曹啟軍導(dǎo)師陳元副教授華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院腫瘤中心中文摘要中文摘要目的:目的:目前關(guān)于Pin1在腫瘤細(xì)胞中的作用的研究主要是發(fā)現(xiàn)它與腫瘤細(xì)胞的
2、分化和增殖有關(guān),表現(xiàn)為在腫瘤細(xì)胞中過(guò)表達(dá),在正常組織中表達(dá)低,去除它則腫瘤細(xì)胞增殖減低,凋亡增加,對(duì)于多種與腫瘤增殖和凋亡有關(guān)的信號(hào)通路關(guān)鍵因子有調(diào)節(jié)作用,如cyclinD1p53等。眾所周知,紫杉類抗腫瘤藥物通過(guò)促進(jìn)微管蛋白聚集并抑制解聚,從而阻止細(xì)胞周期于G2M期,促進(jìn)細(xì)胞凋亡,機(jī)制可能與使bcl2基因表達(dá)下調(diào),Bax基因表達(dá)上調(diào)有關(guān)。由目前研究的結(jié)果,Pin1基因也是一個(gè)與腫瘤細(xì)胞分化凋亡有關(guān)的基因,那么這二者之間有無(wú)關(guān)系,這正是
3、我們所要關(guān)注的,實(shí)驗(yàn)從蛋白水平探索紫杉類藥物是否會(huì)引起Pin1表達(dá)的變化及其可能機(jī)制。方法:方法:1紫杉醇對(duì)紫杉醇對(duì)A549細(xì)胞中細(xì)胞中Pin1蛋白表達(dá)的影響蛋白表達(dá)的影響培養(yǎng)A549細(xì)胞,先驗(yàn)證Pin1蛋白在其中呈現(xiàn)高表達(dá)。然后在培養(yǎng)的細(xì)胞中加入一定濃度的紫杉醇,先觀察細(xì)胞的凋亡,然后在不同的時(shí)間點(diǎn)0h24h48h72h分別提取細(xì)胞總蛋白,設(shè)空白對(duì)照組,然后進(jìn)行免疫印跡試驗(yàn),評(píng)價(jià)Pin1蛋白的表達(dá)是否有變化。因?yàn)橐延械难芯孔C實(shí)單純抑制
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