阿托伐他汀對人臍靜脈內皮細胞和大鼠胸主動脈平滑肌細胞Adropin相關基因及蛋白表達的影響.pdf

1、第一部分阿托伐他汀對人臍靜脈內皮細胞Adropin相關基因及蛋白表達的影響
　　目的：
　　探討阿托伐他汀對人臍靜脈內皮細胞(human umbilical endothelial cell, HUVEC)Adropin相關基因及蛋白表達的影響。
　　方法：
　　將不同濃度的阿托伐他汀(0.002 umol/l、0.02 umol/l、0.2 umol/l、2 umol/l、20umol/l)與HUVEC共培養(yǎng)6

2、小時(hour,h)、12 h、24h。采用MTT法檢測HUVEC的增殖情況。半定量逆轉錄聚合酶鏈反應法檢測HUVEC Adropin mRNA的表達。ELISA法測定細胞上清液中Adropin蛋白的表達。
　　結果：
　　1.不同濃度的阿托伐他汀與HUVEC共培養(yǎng)6h時,20 umol/l濃度組增殖活力明顯高于對照組(P<0.05),其他各濃度組差異無統(tǒng)計學意義。共培養(yǎng)12h時,0.02umol/l、0.2umol/l、2

3、umol/l、20umol/l濃度組細胞活力顯著高于對照組(P<0.05),0.2umol/l、2umol/l、20umol/l濃度組活力顯著高于0.002umol/l濃度組(P<0.05)。共培養(yǎng)24h時,各濃度組細胞活力均顯著高于對照組(P<0.05),0.02umol/l、0.2umol/l、2umol/l、20umol/l濃度組活力顯著高于0.002umol/l濃度組(P<0.05)。
　　同一濃度阿托伐他汀分別與HUVE

4、C共培養(yǎng)6h、12h、24h,12h和24h組活力明顯高于6h組(P<0.05)。
　　2.不同濃度組阿托伐他汀與HUVEC共培養(yǎng)6h、12h、24h后,Adropin mRNA的表達均顯著高于對照組(P<0.001),0.02umol/l、0.2umol/l、2umol/l、20umol/l濃度組Adropin mRNA的表達顯著高于0.002umol/l組(P<0.001)。同一濃度阿托伐他汀分別與HUVEC共培養(yǎng)6h、12h

5、、24h,12h和24h組mRNA表達量明顯高于6h組(P<0.01)。
　　3.不同濃度的阿托伐他汀與HUVEC分別共培養(yǎng)6h、12h、24h,各濃度組HUVEC上清中Adropin蛋白的表達顯著高于對照組(P<0.001),0.02umol/l、0.2umol/l、2umol/l、20umol/l濃度組Adropin蛋白的表達顯著高于0.002umol/l組(P<0.001)。
　　同一濃度阿托伐他汀分別與HUVEC共培

6、養(yǎng)6h、12h、24h時,12h和24h組蛋白表達量明顯高于6h組(P<0.001)。
　　4. Adropin蛋白含量與HUVEC吸光度值(OD值)進行Pearson相關性分析顯示不同時間段各濃度組adropin與OD值呈顯著正相關(6h,相關系數(shù)r=0.471,P=0.049;12h,r=0.756,P=0.001;24h,r=0.725,P=0.001)。
　　結論：
　　1.阿托伐他汀能夠促進HUVEC的增殖,

7、并呈劑量和時間依賴性。
　　2.阿托伐他汀能夠促進HUVEC Adropin相關基因及蛋白的表達,且呈劑量和時間依賴性。
　　3. HUVEC的增殖活力與其Adropin蛋白的表達呈正相關。
　　第二部分阿托伐他汀對大鼠胸主動脈平滑肌細胞Adropin相關基因及蛋白表達的影響
　　目的：
　　探討阿托伐他汀對大鼠胸主動脈平滑肌細胞(rat aortic smooth muscle cell, RASMC)A

8、dropin相關基因及蛋白表達的影響。
　　方法：
　　原代培養(yǎng)SD大鼠的RASMC,免疫熒光和免疫細胞化學染色法進行鑒定,取4-5代細胞進行試驗。.不同濃度的阿托伐他汀(0.02 umol/l、0.2 umol/l、2 umol/l、20umol/l)與RASMC分別共培養(yǎng)6h、12h、24h。采用MTT法檢測RASMC的增殖情況。半定量逆轉錄聚合酶鏈反應法檢測RASMC Adropin mRNA的表達。ELISA法測定細

9、胞上清液中Adropin蛋白的表達。
　　結果：
　　1.不同濃度的阿托伐他汀與RASMC共培養(yǎng)24h時,各濃度組細胞活力顯著低于對照組(P<0.05),0.02umol/l、0.2umol/l阿托伐他汀組活力明顯高于20umol/組(P<0.05)。
　　同一濃度阿托伐他汀與RASMC共培養(yǎng)6h、12h、24h,12h和24h組活力明顯低于6h組(P<0.05)。
　　2.不同濃度的阿托伐他汀與RASMC共培養(yǎng)

10、,各濃度組Adropin mRNA表達量均高于對照組(P<0.05);隨著濃度增大,細胞中Adropin mRNA表達量逐漸降低(P<0.05)。
　　同一濃度阿托伐他汀分別與RASMC共培養(yǎng)6h、12h、24h,12h和24h組Adropin mRNA表達量明顯高于6h組(P<0.01)。
　　3.不同濃度的阿托伐他汀與RASMC分別共培養(yǎng)6h、12h、24h,各濃度組RASMC上清中Adropin蛋白的表達顯著高于對照組

11、(P<0.05)。隨著濃度增大,細胞中Adropin蛋白的表達量逐漸降低(P<0.05)。
　　同一濃度的阿托伐他汀分別與RASMC共培養(yǎng)6h、12h、24h,Adropin蛋白的表達量隨著時間延長明顯增加(P<0.05)。
　　4. Adropin蛋白含量與RASMC吸光度值(OD值)進行Pearson相關性分析顯示不同時間段各濃度組 adropin與 OD值呈顯著正相關(6h,相關系數(shù) r=0.694, P=0.012)