阿托伐他汀對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中LXRα及其靶基因、炎癥因子、粘附因子表達(dá)的影響.pdf

1、目的：用脂多糖(Lipopolysacctlaride，LPS)刺激人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，在體外模擬內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥狀態(tài)，觀察阿托伐他汀、LXR激動(dòng)劑T0901317及兩者合用對(duì)LPS刺激的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中膽固醇調(diào)節(jié)受體LXRα及其靶基因ABCA1、SREBP-1c、炎癥因子IL-6、粘附因子PECAM-1、ICAM-1的mRNA表達(dá)的影響，并探討其相關(guān)機(jī)制。
　　 方法：將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞用含有10％胎牛血清、1％雙抗(鏈霉素/青

2、霉素)的Gibco1640培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，并按細(xì)胞計(jì)數(shù)后培養(yǎng)至6孔板中，進(jìn)行以下干預(yù)實(shí)驗(yàn)。①對(duì)照組(加入2μl的PBS溶液)與脂多糖干預(yù)組(用終濃度為100ng/ml的LPS干預(yù)細(xì)胞24小時(shí))；②阿托伐他汀干預(yù)組(用不同濃度的阿托伐他汀0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L及DMSO)干預(yù)細(xì)胞2小時(shí)，然后加入脂多糖共同干預(yù)22小時(shí)；③LXR激動(dòng)劑T0901317干預(yù)組(先用T09013171μmol/L或DMSO干預(yù)細(xì)胞2

3、小時(shí)，然后加入脂多糖共同干預(yù)22小時(shí))；④阿托伐他汀+T0901317組(先用DMSO、阿托伐他汀、T0901317以及阿托伐他汀和T0901317共同干預(yù)2小時(shí)，然后加入脂多糖100ng/ml共同干預(yù)22小時(shí))。以上所有實(shí)驗(yàn)后收獲細(xì)胞，用Trizol提取細(xì)胞總RNA，然后進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄，并行real-time PCR進(jìn)行半定量測(cè)定。比較各組中LXRα及其靶基因、炎癥因子及粘附因子的表達(dá)變化。
　　 結(jié)果：與對(duì)照組相比，LPS可以抑

4、制人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中LXRα及其靶基因ABCA1、SREBP-1 mRNA的表達(dá)，促進(jìn)炎癥因子IL-6及粘附因子ICAM-1、PECAM-1 mRNA的表達(dá)；阿托伐他汀可以呈濃度依賴性地上調(diào)細(xì)胞中LXRα及其相應(yīng)靶基因的表達(dá)，抑制相應(yīng)炎癥因子及粘附因子表達(dá)，而T0901317可以明顯上調(diào)細(xì)胞中LXRα、ABCA1及SREBP-1的表達(dá)，抑制IL-6、ICAM-1及PECAM-1的表達(dá)；T0901317和阿托伐他汀合用可明顯增強(qiáng)以上基因的