超聲造影對胎盤屏障通透性影響的實驗研究.pdf

1、背景： 超聲造影劑和超聲造影技術的發(fā)展為超聲觀察組織器官的微循環(huán)和灌注創(chuàng)造了條件，近年的研究表明，超聲造影可以為婦科及胎盤某些疾病的診斷提供比常規(guī)超聲更豐富的信息，并且對某些胎盤疾病及婦科疾病的診斷有很大的幫助。 超聲造影劑的微泡大小與紅細胞相似，在正常情況下不能通過胎盤屏障。有學者將造影劑用于妊娠獼猴實驗胎盤研究，注射超聲造影劑后進行胎盤循環(huán)及子宮動脈、胎猴臍動脈和大腦中動脈的觀察。造影劑使胎盤母體面血管顯示增強，而對

2、胎猴循環(huán)無明顯影響。在對69例孕晚期單胎孕婦行超聲造影(Levovist)檢測子宮-胎盤血循環(huán)，結(jié)果亦顯示孕晚期應用超聲造影劑檢測子宮胎盤血循環(huán)未對母體及胎兒造成損害。但這些研究并未深入到胎盤的顯微及超微結(jié)構(gòu)，也沒有對胎盤屏障的通透性做進一步的研究。 現(xiàn)有研究表明，由于造影劑微泡的空化核作用，平均強度較低的診斷超聲亦可以產(chǎn)生空化效應，在生物體內(nèi)表現(xiàn)為聲孔效應，使細胞膜通透性改變。超聲造影劑在超聲波的作用下還可引起血腦屏障、毛細血

3、管通透性改變。診斷級超聲輻照下，超聲波作用于微泡的空化效應可使體外培養(yǎng)的單層細胞出現(xiàn)細胞膜短暫性通透性增加，使得大分子物質(zhì)能夠進入到細胞內(nèi)。近年來，超聲造影在婦科疾病診斷中的應用獲得了良好的效果，但是在臨床應用中，診斷劑量的超聲輻照造影劑微泡是否會通過空化效應使胎盤屏障通透性增加，進而對孕婦及胎兒產(chǎn)生影響，目前尚未見報道。 研究目的： 1.應用CPS技術觀察造影劑在胎盤的灌注情況； 2.了解不同機械指數(shù)超聲造影對

4、胎盤屏障通透性的影響； 3.觀察胎盤在超聲造影后超微結(jié)構(gòu)的變化。 方法： 1.對8只孕鼠進行超聲造影，MI0.3連續(xù)輻照5min，造影劑量0.1ml/kg。利用超聲造影連續(xù)脈沖對比(Contrastpulsesequencing，CPS，)技術及其配套的灌注定量分析軟件得到胎盤超聲造影各參數(shù)值和時間-強度曲線。 2.72只孕鼠隨機分為9組，每組8只，超聲輻照聯(lián)合造影劑組按MI=0.13，1.0，1.4及連

5、續(xù)輻照(5min)和間歇輻照(輻照10s，間歇10s，共5min)分為6組、單純微泡組、單純超聲組、空白對照組，造影劑量1ml/kg。利用。EB在綠色激發(fā)光照射下，自顯紅色熒光的特性，用熒光顯微鏡觀察孕鼠胎盤及胎鼠的染色情況。 3.60只孕鼠隨機分為10組，每組6只，超聲輻照聯(lián)合造影劑組按MI=0.13，1.0，1.4及連續(xù)輻照(5min)和間歇輻照(輻照10s，間歇10s，共5min)分為6組、單純超聲組按連續(xù)輻照(5min)

6、和間歇輻照(輻照10s間歇10s，共5min)分為2組、單純微泡組、對照組，造影劑量1ml/kg。對胎盤及胎鼠進行EB淬取，用分光光度儀比色，測量其光密度值并計算出EB濃度及含量。 4.36只孕鼠隨機分為6組，每組6只，微泡聯(lián)合超聲輻照組按MI=0.13，1.0，1.4分3組，單純超聲組MI為1.4，單純微泡組，空白對照組，輻照時間5min，造影劑量1ml/kg。用硝酸鑭作為示蹤劑，透射電鏡下觀察胎盤及胎鼠的鑭顆粒沉積情況，從超

7、微結(jié)構(gòu)上了解超聲造影對胎盤屏障影響。 結(jié)果： 1.用CPS技術對超聲造影在胎盤的灌注進行定量分析，觀測到胎盤有明顯的造影劑動態(tài)增強過程，而胎鼠沒有造影劑顯影。時間-強度曲線顯示，子宮肌壁的造影劑到達時間和達峰值強度時間比胎盤早約3s左右(p＜0.01)，但峰值強度相近(p＞0.05)； 2.大體觀察結(jié)果：注射EB后即可見動物的全身各組織迅速藍染。注射造影劑，給予不同MI的超聲輻照后取出胎盤及胎鼠，可見胎盤被染成深

8、藍色，而胎鼠未被染色呈半透明淺粉色； 3.熒光顯微鏡觀察結(jié)果：在綠色激發(fā)光狀態(tài)下，EB呈現(xiàn)鮮艷明亮的紅色熒光。對照組及處理組胎盤組織，均可見明顯的紅色熒光斑塊，從母體側(cè)到胎兒側(cè)呈遞減趨勢，而胎鼠組織內(nèi)未見紅色熒光顯像； 4.組織中EB定量測定結(jié)果：胎盤在不同機械指數(shù)的超聲波輻照聯(lián)合造影劑時，EB含量明顯高于對照組(p＜0.01)，而單純超聲、單純微泡組與對照組無明顯區(qū)別(p＞0.05)。胎鼠無論在超聲波聯(lián)合造影劑組及單純

9、超聲、單純微泡組EB含量與對照組均無明顯區(qū)別(P＞0.05)。同一組別中，胎盤的EB含量明顯高于胎鼠(p＜0.01)； 5.透射電鏡下觀察到對照組及單純微泡組胎盤只在細胞間隙可見硝酸鑭顆粒沉積，單純超聲及微泡聯(lián)合超聲輻照各組除細胞間隙，在合體滋養(yǎng)細胞胞漿內(nèi)亦可見鑭顆粒的沉積。但微泡聯(lián)合超聲輻照各組，不同的MI，電鏡結(jié)果沒有明顯差別。 6.單純微泡組胎盤超微結(jié)構(gòu)與對照組無明顯差別。單純超聲組及微泡聯(lián)合超聲輻照組胎盤合體滋養(yǎng)