CO-,2-氣腹對結直腸腫瘤黏附侵襲能力影響的基礎與臨床研究.pdf

1、目的:研究不同壓強持續(xù)性CO<,2>氣腹對結腸癌細胞表面黏附分子表達的動態(tài)影響，對結腸癌細胞黏附侵襲能力以及在腹腔鏡結直腸癌手術中對患者遠期療效的影響。 方法:建立體外氣腹模型，選用人結腸癌細胞株SWll16，分別在不同壓強99.5％醫(yī)用CO<,2>氣體(6，9，12和15 mmHg)以及常規(guī)培養(yǎng)條件下暴露1h。①使用流式細胞技術(FACScan)和實時熒光定量PCR檢測SWll16細胞表面黏附分子上皮鈣粘著蛋白(E-cadhe

2、fin)，細胞間黏附分子-1(ICAM-1)，CD44，CD44v6和E-選擇素(E-selectin)在處理后O，12，24，48和72 h的表達；取各組處理后Oh和72h細胞進行體外黏附試驗。②另選人結腸癌細胞株L,OVO，Col0205，與SWlll6一同按上述方法分組處理，取各組處理后0h和72h細胞進行體外侵襲試驗。③收取SWlll6經體外氣腹模型及對照組處理的各組細胞，分別注入每組16只裸鼠腹腔。2周后，各組裸鼠取10只處死

3、，觀察腹腔內腫瘤結節(jié)數(shù)及各臟器轉移情況。各組剩余6只裸鼠觀察生存時間。④前瞻性非隨機的將2001年9月至2005年3月25l例中低位直腸癌病例分為腹腔鏡組(LTME)110例與開腹組(OTME)141例。將2001年4月至2005年6月122例右半結腸癌病例分為腹腔鏡組(LRH)57例與開腹組(ORH)65例。隨訪患者復發(fā)或轉移時間以及生存時間，比較腹腔鏡組與開腹組病例的復發(fā)轉移結果與長期生存結果。 結果:①黏附分子的表達：F

4、ACScan結果顯示，經各組壓強CO<,2>氣腹處理后，SWll16表面各黏附分子的表達與處理前相比變化有顯著性(P<0.05)，這些變化在各壓強CO<,2>處理后72h之前均恢復至處理前水平，或低于處理前水平(P<0.05)。在處理后Oh，隨CO<,2>氣腹壓強增高，：E-cadherin、CD44和ICAM-1表達量降低(P<0.05)，結腸癌細胞的黏附能力也呈下降的趨勢(P<0.05)，處理后72 h，各壓強組之間的細胞黏附差異無

5、顯著性。實時熒光定量PCR檢測顯示相似結果。②體外侵襲試驗：SW1116細胞經15mmHg CO<,2>處理后Oh，侵襲細胞顯著少于處理前(P<0.05)；氣腹處理后Oh，15mmHg壓強組的細胞侵襲顯著低于其他各壓強組(P<0.05)；而6mmHg壓強組則顯著高于其他各組(P<0.05)。IOVO，ColO205細胞均有相似的變化趨勢。在CO<,2>氣腹處理后72h，各組細胞侵襲與各自處理前細胞相比無顯著差異，各壓強組的結腸癌細胞穿膜

6、量亦無顯著差異(P>0.05)。③各組裸鼠致瘤率的差異無統(tǒng)計學意義。裸鼠腹腔內瘤結節(jié)數(shù)：6mmHg組(41.7±14.90)與15mmHg組(29.7±9.91)之間差異有統(tǒng)計學意義(P=0.04.6)。不同壓強組的各臟器轉移情況以及生存率的差異無統(tǒng)計學意義。④腹腔鏡組與開腹組的右半結腸癌、中低位直腸癌手術均未出現(xiàn)切口／戳孔種植，在局部復發(fā)、遠處轉移、總體生存率和無瘤生存率等方面亦無顯著差異。 結論:①CO<,2>氣腹能對腫瘤