乙肝病毒PreC區(qū)、C啟動子區(qū)、PreS2區(qū)基因突變與肝臟疾病相關(guān)性的研究.pdf

1、乙肝病毒Pre0區(qū)、C啟動-Z區(qū)、PreS2區(qū)基因突變與肝臟疾病相關(guān)性的研究 研究背景：乙肝病毒感染者可引起急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、重癥肝炎和無癥狀的HBV攜帶狀態(tài)。除了與宿主的免疫反應(yīng)有關(guān)，肝炎病毒本身的變異也是一個重要因素。HBV變異與臨床的關(guān)系是乙型肝炎研究的熱點之一。近年來發(fā)現(xiàn)HBVPreC區(qū)ntl896位G—A、CP區(qū)ntl762A—T、ntl764G—A突變株感染是引起部分病人暴發(fā)性肝炎和慢性肝炎病情加重的原因之

2、一。而PreS2區(qū)起始密碼變異和缺失變異與肝炎病情輕重的關(guān)系也引起人們極大關(guān)注。我們的實驗是在以上研究的基礎(chǔ)上對慢性無癥狀HBV攜帶者、慢乙肝、肝硬化三組病人的HBV基因進行PreC區(qū)、CP區(qū)、PreS2區(qū)三個區(qū)域變異進行檢測，以期研究其與肝病病情進展是否有關(guān)。另外，這三個區(qū)域的三重聯(lián)合變異也是我們實驗的較新之處。 目的：研究乙型肝炎病毒(HBV)PreC區(qū)1896位G—A、C啟動子(CP)1762和1764位雙突變、以及Pre

3、S2區(qū)基因突變與HBV不同感染狀態(tài)的關(guān)系，探討其臨床意義。 方法：對53例慢性無癥狀乙肝病毒攜帶者、50例慢乙肝患者、43例肝硬化病人進行血清DNA擴增(PCR法)，經(jīng)瓊脂糖電泳后，將C基因和PreS2基因同時陽性者用雙脫氧測序法檢測這三組病人HBVDNA的PreC區(qū)1896位、CP區(qū)1762和1764位、PreS2區(qū)基因突變的情況，比較三組病人的上述三個區(qū)域的突變率、比較慢乙肝組按病情輕重分類的變異情況、比較所有病人按HBeA

4、g陽性HBeAg陰性分類的三個區(qū)域的變異情況、比較肝硬化組按Child分級分類的三個區(qū)域的變異情況。 結(jié)果：在不同臨床類型的感染者中，PreC區(qū)、CP區(qū)變異檢出率以肝硬化組最高(8／18，16／18)，其次為慢乙肝組(9／26，34．6％：19／26，73．1％)，再次為慢性攜帶者組(0／16，O％；3／16，18．8％)，前兩組分別同慢性攜帶者組相比差異有顯著性意義(g=0．0001；~=0．0007)，而慢乙肝組與肝硬化組彼

5、此之間的差異無顯著性意義(P=0．2063)。PreS2區(qū)缺失變異也以肝硬化組最高(3／18)，其次為慢乙肝組(4／26)，而慢性攜帶者組未發(fā)現(xiàn)PreS2區(qū)缺失突變。但二組的缺失突變率與慢性攜帶者相比差異無顯著意義。另外，就PreC區(qū)1896位與CP區(qū)1762、1764位雙重聯(lián)合變異率來看，肝硬化組(7／18)高于慢乙肝組(6／26)，并且明顯高于慢性攜帶者組，差異有顯著意義(P=O．0058；P=O．0403)。PreC區(qū)、CP區(qū)、P

6、reS2區(qū)三重變異率在慢性攜帶者組為O，而在慢乙肝組和肝硬化組各l例。另外還發(fā)現(xiàn)一些CP區(qū)其他位點變異如G1777A、T1721G、G1729A等。 結(jié)論：前C區(qū)1896位、CP區(qū)1762和1764位突變普遍存在于慢乙肝和肝硬化病人中，而非慢性攜帶者中，其中以CP區(qū)變異率更高，因此，HBV這三個區(qū)域的變異尤其是CP區(qū)變異可作為慢性無癥狀攜帶者隨訪的重要指標，可作為病情發(fā)展的預(yù)示信號。肝硬化患者突變率與慢乙肝無顯著差異，說明肝臟病