紫杉醇對人宮頸癌細胞系HCE-,1-影響的蛋白質(zhì)組學研究.pdf

1、中南大學博士學位論文紫杉醇對人宮頸癌細胞系HCE影響的蛋白質(zhì)組學研究姓名：曹蘭琴申請學位級別：博士專業(yè)：婦產(chǎn)科學指導教師：林秋華20070501博士學位論文 中文摘要較對照組G 2 期細胞明顯增加，兩者比較差異有顯著性( P < 0 ．0 5 ) 。( 3 )通過M T F 實驗和流式細胞儀結(jié)果確定紫杉醇( O ．0 5 1 1 t o o l ／L ) 作用宮頸癌H C E l 細胞2 4 小時對癌細胞增殖抑制作用及G 2 期細

2、胞影響最大，故選擇O ．0 5 u m o l ／L 紫杉醇干預H C E l 細胞2 4 小時進行蛋白質(zhì)組學分析。( 4 ) 蛋白質(zhì)組學結(jié)果如下：①得到了分辨率較高、重復性較好的處理組和對照組的雙向凝膠電泳圖譜，處理組和對照組3 塊凝膠的平均蛋白質(zhì)點數(shù)分別為9 1 2 ±1 8 和8 7 9 4 - _ 2 5 ，平均匹配的點數(shù)分別為7 6 9 ±1 7 和7 7 1 ±1 3 ，匹配率達8 4 ．5 ％

3、和8 7 ．6 ％；處理組與對照組3 塊不同膠之間蛋白質(zhì)點在等電聚焦( I s o e l e c t r i cf o c u s i n g ，I E F ) 方向的偏差是1 ．3 2 2 _ 4 - 0 ．2 2 8I ／I l T I ，在十二烷基磺酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳( S o d i u m d o d e c y l s u l f a t e - p o l y a c r y l a m i d eg e le l

4、e c t r o p h o r e s i s ，S D S —P A G E )方向上的偏差為1 ．1 4 5 ±0 ．1 3 7 m m 。②比較分析處理組和對照組的雙向凝膠電泳圖譜，找到差異蛋白質(zhì)點4 2 個( 差異蛋白點都是2 倍以上差異且在三組中都有相同的差異) ，其中在處理組中表達上調(diào)的1 3個，在處理組中表達下調(diào)的1 7 個，僅在處理組中表達的7 個，僅在對照組中表達的5 個。⑨選擇表達量差異較明顯的2 1

5、個蛋白質(zhì)斑點進行質(zhì)譜分析，共有1 5 個蛋白得到鑒定，其中8 個蛋白在處理組表達上調(diào)，7 個蛋白在處理組表達下調(diào)。④使用W e s t e r nb l o t 技術(shù)對角蛋白8 及a - 烯醇化酶進行驗證，角蛋白8 及a - 烯醇化酶在處理組表達下調(diào)，與蛋白質(zhì)組學的結(jié)果一致。結(jié)論：①紫杉醇對宮頸癌細胞H C E l 的增殖具有抑制作用。②低濃度紫杉醇只影響宮頸癌細胞凋亡率；高濃度紫杉醇既影響宮頸癌細胞的凋亡率，又能改變細胞周期。⑨肽基脯