桑黃菌絲體多糖的制備、理化性質(zhì)及抗氧化活性研究.pdf

1、桑黃（Phellinus linteus）是一種珍稀的藥用真菌，多糖是主要活性成分之一，具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗氧化、降血糖等生物活性和藥理作用。然而，日前國(guó)內(nèi)外研究桑黃多糖還主要以水提物或水提多糖為主，限制了桑黃多糖的深度開(kāi)發(fā)及應(yīng)用。本文以桑黃菌絲體為原料，采用不同提取介質(zhì)連續(xù)制備三種活性多糖，分析和比較多糖的理化性質(zhì)、分子特性和抗氧化活性，篩選高活性桑黃多糖，研究活性多糖的分離純化、結(jié)構(gòu)表征和生物活性。主要研究結(jié)果如下:
　　

2、采用熱水、1％（NH4)2C2O4和1.25 M NaOH/0.05％ NaBH4連續(xù)從桑黃菌絲體中得到PL-W、PL-A和PL-N三種活性多糖。理化性質(zhì)研究表明，PL-W和PL-A主要由葡萄糖組成，PL-N主要由木糖和阿拉伯糖組成且多糖含量和糖醛酸含量最高。PL-W和PL-N主要由高分子量組分構(gòu)成，而PL-A主要由低分子量組分構(gòu)成。在水溶液中，三種多糖均呈緊密的無(wú)規(guī)線團(tuán)鏈構(gòu)象。
　　通過(guò)體外抗氧化模型，研究發(fā)現(xiàn)，桑黃菌絲體多糖P

3、L-W、PL-A和PL-N均能較好地清除DPPH、(·)OH、ABTS(·)+自由基和還原三價(jià)鐵離子，同時(shí)，對(duì)H2O2誘導(dǎo)的SH-SY5Y神經(jīng)細(xì)胞起保護(hù)作用。其中，PL-N較PL-W和PL-A具有明顯的清除自由基能力和體外抗氧化活性，且呈劑效依賴關(guān)系，可作為功能性食品應(yīng)用于膳食、理療中。
　　利用D-半乳糖所致的動(dòng)物亞急性衰老模型，綜合評(píng)價(jià)堿提桑黃菌絲體多糖PL-N的體內(nèi)抗氧化活性。研究發(fā)現(xiàn)，PL-N灌胃40天后，小鼠（胸腺、脾臟

4、、肝臟）臟器指數(shù)，肝臟和血清中的抗氧化酶(SOD、GSH-Px、CAT)活性均顯著增加(p＜0.05、p＜0.01或p＜0.001);MDA含量顯著降低(p＜0.05、p＜0.01或p＜0.001);小鼠肝臟中總抗氧化能力(TAOC)能力顯著提高(p＜0.05、p＜0.01或p＜0.001)。這些結(jié)果揭示PL-N具有明顯的體內(nèi)抗氧化活性。
　　運(yùn)用DEAE-Sephadex A-25 fast flow柱層析對(duì)堿提桑黃菌絲體多糖P

5、L-N進(jìn)行分離純化，獲得均一活性組分PL-N1。通過(guò)酸水解、甲基化、凝膠滲透色譜(GPC)、氣相色譜(GC)、氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)、紅外光譜和核磁共振等方法推斷了PL-N1的化學(xué)結(jié)構(gòu)，研究表明，PL-N1多糖含量為98.7％，重均分子量(Mw)為343000kDa,主要由阿拉伯糖、木糖、葡萄糖和半乳糖組成，分子摩爾比為4.0∶6.7∶1.3∶1.0，骨架結(jié)構(gòu)為(1→4)-β-D-吡喃木糖殘基、(1→2)-α-D-吡喃木糖殘基、(1→4