桑黃菌絲體多糖的分離、純化及結(jié)構(gòu)初探.pdf

1、桑黃(Phellinus linteus)是目前已知抗癌效果顯著的藥用真菌，其主要功效成分是多糖。由于人類(lèi)的大量采摘，使得野生桑黃資源緊缺，因此需要人工培養(yǎng)來(lái)獲得大量菌絲體來(lái)滿足市場(chǎng)的需求。近年來(lái)對(duì)桑黃培養(yǎng)基的研究較多，但是對(duì)桑黃多糖分離純化的研究較少。
　　 本文在桑黃液體培養(yǎng)過(guò)程中跟蹤檢測(cè)各項(xiàng)生理指標(biāo)的變化，對(duì)桑黃菌絲體主要營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行測(cè)定與分析；采用超聲波前處理與熱水浸提相結(jié)合的方法提取菌絲體多糖；運(yùn)用大孔吸附樹(shù)脂脫除粗多

2、糖中的蛋白質(zhì)；以DEAE纖維素陰離子交換柱和葡聚糖凝膠柱為載體分離純化得到的多糖，對(duì)純化后的各組分進(jìn)行紫外掃描，利用氣相色譜檢測(cè)多糖的單糖組成。試驗(yàn)主要得出以下結(jié)論：
　　 (1)在150mL裝液量、10％接種量、28℃、160r/min的培養(yǎng)條件下，桑黃菌的生長(zhǎng)呈一定的周期性；菌絲生長(zhǎng)量在168h達(dá)到最大13.898g/L;發(fā)酵液中的pH值先下降，然后上升，最后穩(wěn)定于5.5左右；還原糖含量呈“拱”形變化趨勢(shì)，在120h達(dá)到最高

3、5.75g/L;氨基態(tài)氮含量先是緩慢上升，72h開(kāi)始急劇下降，96h之后趨于穩(wěn)定。菌絲體主要營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定結(jié)果為：粗蛋白含量為27.21％，粗纖維含量為9.56％，粗脂肪含量為2.67％，灰分為9.16％，總糖和還原糖含量分別為6.33mg/mL和0.46mg/mL。
　　 (2)采用響應(yīng)面方法研究超聲波輔助提取粗多糖的工藝條件，得到最佳工藝條件為：超聲時(shí)間46min、超聲功率492W及液固比為21時(shí)，粗多糖得率為0.71％。

4、r>　　 (3)靜態(tài)試驗(yàn)篩選出D-101-I樹(shù)脂對(duì)蛋白質(zhì)的吸附效果最好，動(dòng)態(tài)試驗(yàn)結(jié)果表明：吸附飽和時(shí)間為4h，飽和吸附量為0.3mg/mL，洗脫劑以乙醇為最佳，最佳洗脫濃度為50％;在上樣量濃度為0.3mg/mL，pH自然，流速為1mL/min，上樣量為2個(gè)柱體積(BV)時(shí)蛋白的吸附率達(dá)到90％;50％乙醇做洗脫劑，用量為2BV時(shí)，對(duì)蛋白洗脫率較低，且可純化濃縮多糖。
　　 (4)經(jīng)DEAE-纖維素初步分離純化得到了三個(gè)組分A