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
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1、目的:研究體外實(shí)驗(yàn)中欖香烯對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞系(MG-63)多藥耐藥的逆轉(zhuǎn)效果,探討其相關(guān)機(jī)制。 方法:采用MTT法測(cè)定阿霉素對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞系(MG-63)的半數(shù)抑制濃度(IC50)以及欖香烯對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞系(MG-63)的低細(xì)胞毒濃度(IC15)和非細(xì)胞毒濃度(IC05)。將細(xì)胞分為A、B、C三組,A組為對(duì)照組,加入半數(shù)抑制濃度的阿霉素;B、C組在A組基礎(chǔ)上還加入非細(xì)胞毒濃度、低細(xì)胞毒濃度的欖香烯,細(xì)胞傳代培養(yǎng)至A組中MG-63細(xì)
2、胞對(duì)半數(shù)抑制濃度的阿霉素完全耐藥后停止干預(yù),檢測(cè)以下指標(biāo):①阿霉素對(duì)干預(yù)后各組MG-63細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度,計(jì)算耐藥倍數(shù)(RF);②采用熒光分光光度計(jì)測(cè)定各組OD值,計(jì)算細(xì)胞內(nèi)阿霉素藥物濃度;③流式細(xì)胞儀測(cè)定原始MG-63細(xì)胞和A、B、C組MG-63細(xì)胞多藥耐藥相關(guān)蛋白1(MRPl)的表達(dá),并對(duì)以上數(shù)據(jù)進(jìn)行分析比較各處理組間的差異。 結(jié)果: ①阿霉素對(duì)干預(yù)后A、B、C組MG-63細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度分別為3.37μg/ml
3、、2.21μg/ml、1.19μg/ml,A、B、C組MG-63細(xì)胞對(duì)阿霉素的耐藥倍數(shù)(RF)分別為11.62、7.62和4.10,A組>13組>C組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ②干預(yù)后A、B、C組MG-63細(xì)胞內(nèi)阿霉素藥物濃度分別為1.21μg/106細(xì)胞、1.96μg/106細(xì)胞、2.71μg/106細(xì)胞,A組
4、08%、B組為25.30%、C組為21.64%,A組>B組>C組>原始MG-63細(xì)胞,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論: ①證實(shí)在體外運(yùn)用非細(xì)胞毒濃度或低細(xì)胞毒濃度的欖香烯乳能有效抑制阿霉素所誘導(dǎo)的人骨肉瘤細(xì)胞MG-63的多藥耐藥性(MDR)。 ②欖香烯體外能下調(diào)人骨肉瘤MG-63細(xì)胞多藥耐藥相關(guān)蛋白1(MRP1)的表達(dá)。 ③欖香烯乳逆轉(zhuǎn)人骨肉瘤MG-63細(xì)胞產(chǎn)生多藥耐藥性(MDR)機(jī)制可能是通過(guò)抑制的多藥耐藥相
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