脂肪酸與PPARy基因互作對奶牛乳腺上皮細(xì)胞乳脂肪合成的調(diào)節(jié)作用及機理.pdf

1、ClassifiedIndex：Confidential(yes／no)：NoCode：N0：DissertationfortheDoctoralDegree1022490059TheEffectofInteractionbetweenFattyAcidandPPARyGeneonRegulationandmechanismofMilkFatSynthesisinDairyCowMammaryEpithelialCellsCandida

2、te：LiuLiliSupervisor：ProfLiQingzhangDegreeCategoryDoctorofAgricultureCollege：CollegeofVeterinaryMedicineFirstleveldiscipline：VeterinaryMedicineSecondleveldiscipline：AnimalBiochemisstryandMolecularBiologyHarbinChinaJune20

3、14東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)博士學(xué)位論文244脂肪酸作用DCMECs后乳脂肪合成關(guān)鍵酶活性的檢測一2125細(xì)胞免疫熒光法進行乳脂肪合成關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子PPARy定位分析2226脂肪酸添加對PPA腳基因沉寂DCMECs乳脂肪合成影響的檢測22261脂肪酸的最佳作用濃度篩選～22262乳脂肪合成相關(guān)基因表達(dá)的檢測23263乳脂肪合成轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的檢測23264乳脂肪合成關(guān)鍵酶活性的檢測一2327脂肪酸添加對PPAR丫基因超表達(dá)DCMECs乳脂肪合成影響

4、的檢測24271引物設(shè)計及PPART基因擴增24272PPA腳基因PCR擴增產(chǎn)物克隆載體構(gòu)建一25273真核表達(dá)載體pGCMV／IRES／EGFP／PPAR7的構(gòu)建26274脂肪酸的最佳作用濃度篩選27275乳脂肪合成相關(guān)基因表達(dá)的檢測一28276乳脂肪合成轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)的檢測一28277乳脂肪合成關(guān)鍵酶活性的檢測一2928數(shù)據(jù)處理293結(jié)果與分析3031奶牛乳腺組織乳脂肪合成相關(guān)基因和相關(guān)蛋白表達(dá)檢測結(jié)果一30311奶牛乳腺組織乳脂肪合

5、成相關(guān)基因表達(dá)結(jié)果30312奶牛乳腺組織乳脂肪合成轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子和相關(guān)蛋白表達(dá)結(jié)果3132奶牛乳腺上皮細(xì)胞原代培養(yǎng)及鑒定3233脂肪酸對DCMECs乳脂肪合成影響的檢測結(jié)果33331乙酸鈉對DCMECs乳脂肪合成影響的檢測結(jié)果33332B羥基丁酸鈉對DCMECs乳脂肪合成影響的檢測結(jié)果37333乙酸鈉和p一羥基丁酸鈉協(xié)同作用對DCMECs乳脂肪合成影響的檢測結(jié)果40334軟脂酸對DCMECs乳脂肪合成影響的檢測結(jié)果44335硬脂酸對DCM

6、ECs乳脂肪合成影響的檢測結(jié)果一4734乳脂肪合成關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子PPA腳定位分析5035脂肪酸對PPARy基因沉寂DCMECs乳脂肪合成影響的檢測結(jié)果50351PPARyRNA沉寂效率50352乙酸鈉對PPAR7基因沉寂DCMECs乳脂肪合成影響的檢測結(jié)果一51353p羥基丁酸鈉對PPARy基因沉寂DCMECs乳脂肪合成影響的檢測結(jié)果55354乙酸鈉和p羥基丁酸鈉協(xié)同作用對PPAR丫基因沉寂DCMECs乳脂肪合成影響的檢測結(jié)果60355軟