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1、【目的】觀察天花蛋白(Trichosanthin,TCS)對(duì)人類髓系白血病細(xì)胞株HL.60細(xì)胞的增殖抑制及凋亡的影響,并揭示TCS誘導(dǎo)HL.60細(xì)胞凋亡與線粒體跨膜電位(△Ψm)、Bcl-2、p53之間的關(guān)系。 【方法】采用MTT比色法測(cè)定TCS對(duì)HL.60細(xì)胞的增長(zhǎng)抑制率;經(jīng)瑞士.吉姆薩(Wright-Gemsa)染色,光鏡下觀察TCS處理后細(xì)胞的形態(tài)改變;用AnnexinV-FITC/PI雙重標(biāo)記,經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞早期凋
2、亡率的變化;應(yīng)用羅單明123(Rhl23)染色,經(jīng)流式細(xì)胞儀分析,檢測(cè)線粒體跨膜電位的改變;用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)HL.60細(xì)胞凋亡相關(guān)基因Bcl-2、p53蛋白的表達(dá)。 【結(jié)果】(1)TCS抑制HL.60細(xì)胞的增殖,促進(jìn)其凋亡,隨作用時(shí)間的延長(zhǎng)、TCS濃度的增加,增殖抑制及促凋亡作用更加明顯;(2)TCS作用后,線粒體的膜電位隨凋亡細(xì)胞的增加而逐漸降低;(3)TCS作用后Bcl-2的表達(dá)顯著下降,而p53的表達(dá)明顯提高。
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