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1、目的:本實(shí)驗(yàn)采用豬胎盤(pán)提取物作為異種疫苗,觀察異種胎盤(pán)提取物是否具有抑制小鼠前列腺種植瘤生長(zhǎng)的作用,并初步探討其抗腫瘤的免疫學(xué)機(jī)制。 方法:通過(guò)對(duì)健康豬的新鮮胎盤(pán)進(jìn)行組織勻漿、凍融、離心、過(guò)濾,獲取上清液制成疫苗。設(shè)0~tg/ml、10ug/ml、50ug/m1、100ug/ml、200ug/ml共5種濃度的豬胎盤(pán)提取物干預(yù)體外培養(yǎng)的小鼠淋巴細(xì)胞,Oug/m1即為對(duì)照組。MTT法檢測(cè)其對(duì)淋巴細(xì)胞增殖的影響。C57BL/6J近交系
2、小鼠20只,隨機(jī)分4組,每組5只,對(duì)照組皮下注射生理鹽水,3實(shí)驗(yàn)組分別用50gg、1 00ug和500ug三種劑量的豬胎盤(pán)提取物腹部皮下注射免疫小鼠,1周后加強(qiáng)免疫1次。加強(qiáng)免疫后1周,各組小鼠腹部皮下注射前列腺癌細(xì)胞5×10<'5>,不同時(shí)間點(diǎn)動(dòng)態(tài)觀察腫瘤體積。免疫組化法結(jié)合MIAS醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)檢測(cè)腫瘤組 織微血管密度。Western blotting方法檢測(cè)免疫小鼠血清是否含有抗小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的抗體。
3、 結(jié)果:與對(duì)照組比較,200ug/ml濃度干預(yù)的實(shí)驗(yàn)組的小鼠淋巴細(xì)胞增殖受到明顯抑制(P<0.05);腫瘤接種18天后,500ug免疫組小鼠腫瘤平均體積明顯小于對(duì)照組(P<0.05);500ug免疫組小鼠腫瘤組織微血管密度與對(duì)照組比較明顯減少(P<0.05);500ug免疫組小鼠血清中可檢測(cè)出抗小鼠自身的VEGF抗體。 結(jié)論:成功從豬胎盤(pán)中提取出了一種新型腫瘤疫苗;該疫苗能抑 制體外培養(yǎng)的小鼠淋巴細(xì)胞增殖;疫苗免疫小鼠
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