異種胎盤提取物誘導(dǎo)小鼠抗前列腺癌免疫反應(yīng)實驗研究.pdf

1、目的：本實驗采用豬胎盤提取物作為異種疫苗，觀察異種胎盤提取物是否具有抑制小鼠前列腺種植瘤生長的作用，并初步探討其抗腫瘤的免疫學(xué)機(jī)制。 方法：通過對健康豬的新鮮胎盤進(jìn)行組織勻漿、凍融、離心、過濾，獲取上清液制成疫苗。設(shè)0~tg／ml、10ug/ml、50ug／m1、100ug／ml、200ug／ml共5種濃度的豬胎盤提取物干預(yù)體外培養(yǎng)的小鼠淋巴細(xì)胞，Oug／m1即為對照組。MTT法檢測其對淋巴細(xì)胞增殖的影響。C57BL/6J近交系

2、小鼠20只，隨機(jī)分4組，每組5只，對照組皮下注射生理鹽水，3實驗組分別用50gg、1 00ug和500ug三種劑量的豬胎盤提取物腹部皮下注射免疫小鼠，1周后加強(qiáng)免疫1次。加強(qiáng)免疫后1周，各組小鼠腹部皮下注射前列腺癌細(xì)胞5×10<'5>，不同時間點動態(tài)觀察腫瘤體積。免疫組化法結(jié)合MIAS醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)檢測腫瘤組 織微血管密度。Western blotting方法檢測免疫小鼠血清是否含有抗小鼠血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的抗體。

3、 結(jié)果：與對照組比較，200ug／ml濃度干預(yù)的實驗組的小鼠淋巴細(xì)胞增殖受到明顯抑制(P<0.05)；腫瘤接種18天后，500ug免疫組小鼠腫瘤平均體積明顯小于對照組(P<0.05)；500ug免疫組小鼠腫瘤組織微血管密度與對照組比較明顯減少(P<0.05)；500ug免疫組小鼠血清中可檢測出抗小鼠自身的VEGF抗體。 結(jié)論：成功從豬胎盤中提取出了一種新型腫瘤疫苗；該疫苗能抑 制體外培養(yǎng)的小鼠淋巴細(xì)胞增殖；疫苗免疫小鼠