重組腺相關病毒載體介導酪氨酸羥化酶（TH）和膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子（GDNF）基因轉導治療帕金森病的實驗研究.pdf

1、帕金森病(PD)是一種常見于中老年人的中樞神經系統(tǒng)變性疾病,其主要病理改變?yōu)楹谫|紋狀體系多巴胺(DA)能神經元進行性變性死亡,紋狀體DA含量降低.由于其病因和發(fā)病機制尚不明確,目前的所有治療手段,包括藥物治療和各種外科手術、腦組織移植等均只限于暫時的癥狀改善,不能從根本上延緩或阻止其病程進展.理想的PD治療方法除了要糾正其腦內DA含量的不足,還要保護殘存的DA能神經元.目前認為,基因治療將可能是實現(xiàn)這一目標的最佳途徑.該研究采用了分子克

2、隆、細胞培養(yǎng)和腦立體定位注射技術等研究方法,分別將TH、GDNF和綠色熒光蛋白基因(GFP)構建入重組腺相關病毒(rAAV)載體中,并分別包裝出含有三種目的基因的假病毒,即rAAV-TH、rAAV-GDNF、rAAV-GFP,通過離體細胞感染研究證實其具有明確的轉基因生物學活性后,再將其分別或聯(lián)合注射到內側前腦束(MFB)切割損傷的PD大鼠模型腦內,以了解rAAV-TH的治療作用和rAAV-GDNF對DA神經元的保護功能,并進一步探索r

3、AAV-TH和rAAV-GDNF聯(lián)合移植的治療效果,以尋找PD基因治療的最佳途徑.該研究采用了rAAV載體分別或聯(lián)合轉導TH與GDMNF基因方法,通過對MFB切割損傷的PD大鼠模型進行治療研究,證實了rAAV載體是一種安全、有效的CNS轉基因治療載體,其轉基因表達時間至少存在6個月以上,TH基因和GDNF基因的聯(lián)合轉染方式較單基因方式可更迅速、更有效地恢復PD大鼠的行為和腦內DA含量,并能有效地保護黑質DA神經元,具有明顯的治療優(yōu)勢.為