腺病毒介導(dǎo)酪氨酸羥化酶基因治療大鼠泌乳素瘤實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文腺病毒介導(dǎo)酪氨酸羥化酶基因治療大鼠泌乳素瘤實(shí)驗(yàn)研究姓名：許志勤申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：神經(jīng)外科指導(dǎo)教師：蘇長保;陳松森2000.5.1中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文 中文摘要摘 要垂體腺瘤是下丘腦一垂體系統(tǒng)最常見、最重要的內(nèi)分泌腫瘤，也是最常見，的顱內(nèi)腫瘤之一。f 對垂體腺瘤的現(xiàn)代綜合治療，不僅要求切除腫瘤，防止復(fù)發(fā)，、解除臨床癥狀，而且要求達(dá)到生物學(xué)上的治愈。但目前仍有部分垂體腺瘤尤其是大腺瘤、侵襲性腺瘤難以

2、完全切除，即使手術(shù)后采取放療和／或藥物治療，垂體功能仍不能恢復(fù)正常，甚至腫瘤復(fù)發(fā)；有些患者雖然對溴隱停等藥物治療敏感，但有一定副作用，更存在長期用藥的不便。上述存在的問題是目前垂體腺瘤治療的難點(diǎn)，尚未得到解決，有待研究更加有效的治療方法。J／臨床實(shí)踐和實(shí)驗(yàn)研究證明，多巴胺( D A ) 或多巴胺激動(dòng)劑，如溴隱?？梢酝ㄟ^激活多巴胺受體途徑，使垂體泌乳素( P R L ) 瘤體積縮小和分泌P R L 降低。酪氨酸羥化酶( t y r o s

3、 i n eh y d r o x y l a s e ，T H ) 是多巴胺合成的限速酶，若用攜帶T H基因的表達(dá)載體轉(zhuǎn)染P R L 瘤細(xì)胞，使腫瘤細(xì)胞自身表達(dá)T H 增加，在充足的作用底物( 酪氨酸) 和協(xié)同因子( 四氫生物蝶呤，B H 4 ) 存在下，將促使多巴胺合成量增加，以達(dá)到治療P R L 瘤的目的。基于上述思路，我們提出了以大鼠P R L 瘤為模型進(jìn)行腺病毒介導(dǎo)T H 基因治療大鼠P R L 瘤實(shí)驗(yàn)研究的課題，經(jīng)過申請后該

4、課題獲得國家自然科學(xué)基金資助。本研究即為該課題的一部分，包含兩部分內(nèi)容：一．應(yīng)用2 9 3 細(xì)胞內(nèi)同源重組法和細(xì)菌內(nèi)同源重組法分別構(gòu)建了攜帶大鼠T He D N A 的復(fù)制缺陷性5 型腺病毒載體A d v t h 和p A d —G F P ．T H ：，’。1 ．應(yīng)用傳統(tǒng)的2 9 3 細(xì)胞內(nèi)同源重組法構(gòu)建了復(fù)制缺陷型腺病毒A d v t h 。先將T Hc D N A 克隆至穿梭質(zhì)粒p A E l s p l A ，然后與腺病毒基因組