人重組IL-24基因治療乳腺癌的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：(1)構(gòu)建hIL-24原核表達(dá)載體pET-21a(+)-IL-24，并在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)，將獲得的rhIL-24蛋白純化復(fù)性，體外實(shí)驗(yàn)觀察rhIL-24蛋白對(duì)乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB-231細(xì)胞)生長(zhǎng)抑制效應(yīng)及誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡的作用；(2)構(gòu)建hIL-24真核表達(dá)載體pcDNA3-hIL24,將其轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞并進(jìn)行穩(wěn)定表達(dá)，體外檢測(cè)CHO細(xì)胞表達(dá)的rhIL-24蛋白對(duì)乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB-231細(xì)胞)的抗腫瘤活性及誘導(dǎo)乳

2、腺癌細(xì)胞凋亡的功能；(3)體外觀察rhIL-24蛋白免疫刺激及抑制血管形成的作用，進(jìn)一步探討rhIL-24蛋白的的生物學(xué)功能；(4)采用原核表達(dá)rhIL-24蛋白和pcDNA3-hIL-24真核質(zhì)粒對(duì)裸鼠乳腺癌動(dòng)物模型進(jìn)行治療研究，觀察和比較兩者治療效果，探討其治療作用機(jī)理?！　〗Y(jié)論：(1)本實(shí)驗(yàn)成功構(gòu)建了pET-21a(+)-IL-24原核表達(dá)載體，在大腸桿菌中得到了高效表達(dá)，獲得了純化復(fù)性的rhIL-24蛋白，證實(shí)了rhIL-24

3、蛋白對(duì)乳腺癌細(xì)胞(MDA-MB-231細(xì)胞)具有生長(zhǎng)抑制和誘導(dǎo)凋亡的功能。(2)成功構(gòu)建了hIL-24真核重組表達(dá)載體pcDNA3-hIL24,經(jīng)轉(zhuǎn)染和篩選后在哺乳類動(dòng)物細(xì)胞CHO細(xì)胞中得到了穩(wěn)定表達(dá)，同樣證明了其表達(dá)產(chǎn)物rhIL-24能抑制MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)，誘導(dǎo)MDA-MB-231細(xì)胞凋亡。(3)rhIL-24蛋白體外能刺激外周血單個(gè)核細(xì)胞(PMBC)誘生IL-6、IFN-γ和TNF-α的分泌；并能抑制CAM血管的形