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文檔簡介
1、目的:優(yōu)化納米沉降法制備載多西他賽-聚乙酸羥基乙酸共聚物(PLGA)納米粒過程中的參數(shù),體外檢測其細(xì)胞毒性及放射增敏性,探討納米載藥系統(tǒng)在腫瘤放射增敏中的應(yīng)用前景。
方法:應(yīng)用納米沉降法制備載多西他賽PLGA納米粒,優(yōu)化制備過程中的相關(guān)參數(shù),用激光粒度儀檢測納米粒的粒徑及分布,場發(fā)射掃描電鏡觀察納米粒的表面形態(tài),zeta電位檢測表面電能,高效液相色譜檢測藥物包封率。MTT法分別檢測載多西他賽納米粒和泰素帝對A549及CNE-1
2、細(xì)胞的增值抑制作用;共聚焦顯微鏡定性觀察A549及CNE-1細(xì)胞對載藥納米粒的攝取情況;流式細(xì)胞儀PI單染法檢測載藥納米粒,藥物以及放射作用后細(xì)胞周期的變化;克隆形成實驗分析并比較載多西他賽納米粒和泰素帝對人肺腺癌細(xì)胞A549和人高分化鼻咽癌細(xì)胞CNE-1的放射增敏作用。
結(jié)果:納米沉降法制備載多西他賽PLGA納米粒的優(yōu)化條件為:TPGS濃度為0.2wt%,油相選擇為丙酮和無水乙醇,油水相之比為1:5,理論載藥量為5%,據(jù)此優(yōu)
3、化條件制備出粒徑130-150nm,包封率為40.83±2.1%,表面光滑呈球形;在A549及CNE-1細(xì)胞中,載藥納米粒對細(xì)胞的增值抑制作用明顯優(yōu)于泰素帝。共聚焦顯微鏡觀察可見細(xì)胞能夠攝取載藥納米粒,載藥納米??蛇M(jìn)入胞漿。PI單染法示載藥納米粒,泰素帝及放射作用均可使A549及CNE-1細(xì)胞阻滯于G2/M期,單純藥物作用時載藥納米粒阻滯效果優(yōu)于泰素帝,當(dāng)聯(lián)合放射作用時阻滯效果更為明顯。在A549細(xì)胞中,載多西他賽納米粒的放射增敏比SE
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