Survivin因子在膀胱癌中的表達以及熊果酸抑制膀胱癌T24細胞機制的體外實驗研究.pdf

1、目的：膀胱腫瘤是泌尿外科最常見的惡性腫瘤，其臨床特點主要是高發(fā)病率、高復發(fā)率和低度惡性。目前認為膀胱腫瘤是一基因病，由多通路及多靶位調控。但其確切病因、發(fā)病機制及復發(fā)機制不清楚。近年來有關膀胱腫瘤發(fā)病的分子機制一直是研究的熱點，其中包括基因突變、原癌基因激活、抑癌基因失活及凋亡失衡等多種發(fā)病機制。Survivin(生存素)因子是近年來發(fā)現(xiàn)的一種凋亡抑制因子，高表達于多種腫瘤組織而在正常成人組織中未見表達，其主要作用是抑制腫瘤細胞凋亡。已

2、有研究表明,survivin在許多腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中起關鍵作用，是估計腫瘤預后和復發(fā)的重要指標。近年來，survivin因子在膀胱腫瘤中的表達國外已有少量研究，初步結果表明，survivin因子在膀胱腫瘤表達上調，有望成為膀胱腫瘤一種新的腫瘤診斷分子標記物和治療的新靶點。 熊果酸是自然界廣泛存在的一種植物類化合物，具有廣泛的生物學效應，其最大的功能是抗腫瘤。體外實驗表明熊果酸可明顯抑制人體多種腫瘤細胞的生長和繁殖。包括對腫瘤

3、細胞有明顯的細胞毒作用，可以抑制腫瘤細胞增殖，阻斷腫瘤生長因子信號通路，誘導凋亡，抑制抗凋亡蛋白的表達，抑制血管生成等作用。 Survivin因子在膀胱腫瘤中的表達目前已有一些研究，但熊果酸對膀胱腫瘤抑制作用國內外尚未見報道。為此，我們在體外研究了熊果酸對膀胱腫瘤細胞的影響，并對其作用機制進行探討。其目的在于：明確survivin因子在膀胱腫瘤中的表達情況及其與臨床病理特征的關系，體外觀察熊果酸對膀胱腫瘤細胞的抑制作用和檢測su

4、rvivin因子經熊果酸處理后的表達變化。其意義在于：闡明survivin因子在膀胱腫瘤發(fā)病機制中的作用和熊果酸治療膀胱腫瘤的可行性。最終目的為臨床提供一種敏感性高、特異性強和無創(chuàng)傷的分子水平腫瘤標志物以及提供一種有效的、無毒副作用的預防和治療膀胱腫瘤的藥物奠定理論基礎。 材料和方法：實驗分兩部分：第一部分：臨床選擇54例經臨床病理確診為膀胱癌的患者，采用免疫組化方法檢測survivin因子在膀胱癌組織中的表達情況，從中分析分析

5、survivin因子的表達情況與患者臨床病理特征的關系。第二部分：體外培養(yǎng)膀胱癌T24細胞，通過應用不同劑量的熊果酸與膀胱癌T24細胞共培養(yǎng)，采用MTT法觀察熊果酸對膀胱癌T24細胞的抑制作用，免疫組化和WesternBlot方法檢測survivin因子表達情況的變化，分析熊果酸抑制survivin因子表達與T24細胞生存率的相關性。 結果：1.Survivin因子在膀胱腫瘤組織和細胞中高表達，其表達水平與膀胱腫瘤的臨床分期、分

6、級及預后有密切相關。 2.Survivin因子在膀胱腫瘤發(fā)病過程中取重要作用，Survivin表達增加與腫瘤進展和復發(fā)有密切關系。 3.熊果酸能明顯抑制膀胱腫瘤細胞的生長，具有濃度和時間依賴性。4.熊果酸能明顯下調膀胱腫瘤細胞survivin因子蛋白的表達水平，具有濃度和時間依賴性。Survivin因子表達下調與腫瘤細胞存活率成正相關。 結論：1.Survivin因子是一抗凋亡因子，在膀胱腫瘤中呈陽性表達，且表達