角膜屏障功能的初步研究.pdf

1、廈門大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當(dāng)方式明確標(biāo)明，并符合法律規(guī)范和《廈門大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動規(guī)范(試行)》。另外，該學(xué)位論文為()課題(組)的研究成果，獲得()課題(組)經(jīng)費或?qū)嶒炇业馁Y助，在()實驗室完成。(請在以上括號內(nèi)填寫課題或課題組負(fù)責(zé)人或?qū)嶒炇颐Q，未有此項聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。)聲明人(簽名)噸謗||8C

2、)口年，o月郝日摘要摘要第一部分：防腐劑BAC對兔角膜上皮屏障功能的急性影響目的：上皮屏障功能是角膜抵御外界刺激的第一道屏障，BAC是目前滴眼液中最常用的防腐劑，長期使用對眼表有一定的毒性作用，本研究旨在探討短期使用BAC對兔角膜上皮屏障功能的影響。方法：新西蘭大白兔右眼滴用BAC，左眼作為陰性對照。實驗分4組：PBS組、0005％BAC組、O01％BAC組及O02％BAC組。每只眼點3次，每次間隔5分鐘。臨床檢測Schirmer、BU

3、T、熒光素染色和孟加拉玫瑰紅染色。IVCM評價中央角膜的形態(tài)學(xué)變化。TER檢測評價BAC對角膜屏障功能的影響。角膜上皮鋪片免疫熒光染色檢測ZO一1、ZO2、Occludin、Claudin1及Ki67的表達(dá)，研究BAC對角膜上皮緊密連接蛋白及細(xì)胞增殖的影響。Tunel方法評價BAC對角膜上皮細(xì)胞凋亡的作用。Westernblot分析和RTPCR研究角膜上皮細(xì)胞ZO一1表達(dá)量的變化。結(jié)果：各濃度BAC組Schirmer、BUT檢測與陰性對

4、照組沒有明顯差異；角膜熒光素染色為陰性；孟加拉玫瑰紅染色陽性，呈片狀或團(tuán)塊狀。IVCM檢測顯示BAC誘導(dǎo)角膜上皮表層細(xì)胞的結(jié)構(gòu)破壞，而角膜上皮基底層細(xì)胞和角膜內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)沒有明顯的影響。BAC引起角膜TER下降，導(dǎo)致ZO1和ZO一2分布不連續(xù)，而對Occludin和Claudin1的染色沒有明顯影響。Westernblot分析和RTPCR顯示，各濃度BAC對ZO1的mRNA和蛋白表達(dá)量都沒有影響。結(jié)論：短期滴用BAC破壞兔角膜上皮細(xì)胞