菟絲子中黃酮類提取物的神經(jīng)保護活性研究.pdf

1、菟絲子(CuscutachinensisLam)為旋花科植物，是中國傳統(tǒng)重要的補益藥之一，具有補陽益陰、固精縮尿、明目止瀉的功效。 選用神經(jīng)細胞的模式細胞株PC12細胞作為實驗對象，利用H2O2對細胞進行損傷，造成直接的氧化損傷模型。利用MTT法檢測菟絲子黃酮類提取物對損傷細胞的細胞活力的影響；采用流式細胞儀技術分析DNA的含量、Hoechst33258熒光染色觀察細胞形態(tài)變化檢測菟絲子黃酮類提取物對細胞凋亡率的影響；利用DPP

2、H法檢測不同濃度提取物體外的清除自由基能力。結(jié)果表明，100mg/l和200mg/l的提取物具有明顯的保護活性，可以顯著提高細胞存活率，減少凋亡細胞數(shù)量；菟絲子黃酮類提取物能夠劑量依賴地清除DPPH自由基。初步確立菟絲子黃酮類提取物具有抗氧化活性。 利用魚藤酮誘導SH-SY5Y細胞凋亡建立帕金森病(PD)體外細胞模型，考察魚藤酮對線粒體凋亡通路的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明，應用魚藤酮24小時后，細胞活力下降，凋亡細胞數(shù)量顯著增加。進一步

3、的機制研究表明，細胞內(nèi)ROS水平上升，線粒體膜電位下降，谷胱甘肽(GSH)和Bcl-2蛋白水平下降。推斷魚藤酮損傷機制為細胞內(nèi)ROS大量產(chǎn)生，谷胱甘肽大量消耗，氧化應激加強；同時線粒體膜電位下降，細胞啟動凋亡程序。 利用魚藤酮模型對菟絲子黃酮類提取物的神經(jīng)保護活性進行了探討。通過細胞活力分析、LDH釋放率測定及AV-PI檢測凋亡細胞數(shù)量，發(fā)現(xiàn)菟絲子黃酮類提取物能夠提高魚藤酮損傷細胞的存活率，減少凋亡，具有明顯的神經(jīng)保護作用。進一