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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:檢測(cè) has-miR-335在卵巢腫瘤組織中的表達(dá)并且分析其與臨床病理的相關(guān)性;在細(xì)胞水平研究 has-miR-335在卵巢癌侵襲轉(zhuǎn)移中的作用機(jī)制。
方法:應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)has-miR-335在17例正常卵巢組織、15例卵巢良性腫瘤組織、8例卵巢交界性腫瘤、55例卵巢惡性腫瘤,以及5對(duì)卵巢癌原發(fā)灶和卵巢癌網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá)。應(yīng)用transwell和Edu的方法檢測(cè)升高h(yuǎn)as-miR-335對(duì)卵巢癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移以
2、及增殖的影響。應(yīng)用細(xì)胞骨架染色的方法檢測(cè)升高h(yuǎn)as-miR-335對(duì)卵巢癌細(xì)胞形態(tài)的影響。用生物醫(yī)學(xué)靶點(diǎn)預(yù)測(cè)軟件分析has-miR-335的靶點(diǎn)并用免疫印跡的方法驗(yàn)證這一靶點(diǎn)。
結(jié)果:相對(duì)于正常卵巢組織,has-miR-335在卵巢惡性腫瘤組織中低表達(dá),而較之卵巢腫瘤原發(fā)灶,其在卵巢癌網(wǎng)膜轉(zhuǎn)移灶中表達(dá)量更低,并且has-miR-335的表達(dá)水平與卵巢癌患者總生存率和無(wú)復(fù)發(fā)生存率密切相關(guān)。生物醫(yī)學(xué)靶點(diǎn)預(yù)測(cè)軟件顯示Bcl-w為ha
3、s-miR-335可能的靶點(diǎn)。升高卵巢癌細(xì)胞中has-miR-335的表達(dá)能夠在不影響卵巢癌細(xì)胞增殖的情況下,明顯降低Bcl-w蛋白水平的表達(dá)和卵巢癌細(xì)胞遷移能力。細(xì)胞骨架染色方法顯示升高h(yuǎn)as-miR-335的表達(dá)后,細(xì)胞的片狀偽足和微絲要少于未轉(zhuǎn)染組和NC組,而細(xì)胞的骨架結(jié)構(gòu)微絲要多于未轉(zhuǎn)染組和NC組。外源性升高Bcl-w可以抵消升高h(yuǎn)as-miR-335對(duì)卵巢癌細(xì)胞的這一系列的影響。
結(jié)論:has-miR-335可以通過(guò)
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