成人乙肝疫苗免疫無(弱)應(yīng)答機制及再免疫方案初探——成人乙肝疫苗接種情況調(diào)查,無(弱)應(yīng)答者體外PBMCs中CD150的表達(dá)及再免疫效果研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究調(diào)查醫(yī)學(xué)院校成人學(xué)生、醫(yī)務(wù)人員乙肝疫苗免疫接種現(xiàn)狀,對乙肝疫苗接種后無(弱)應(yīng)答的成人采用三種不同方案進(jìn)行再免疫:復(fù)種(仍使用原標(biāo)準(zhǔn)劑量)、增加疫苗劑量、聯(lián)合粒細(xì)胞一巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM—CSF),探索行之有效的乙肝疫苗再免疫方法,同時研究乙肝疫苗無(弱)應(yīng)答者相關(guān)的免疫機制,為制訂相應(yīng)策略提供一定的科學(xué)依據(jù)。全文分為3個部分。 第1章:成人學(xué)生、醫(yī)務(wù)人員乙型肝炎病毒感染及乙肝疫苗接種情況調(diào)查 第2章:成人乙

2、肝疫苗無(弱)應(yīng)答者三種不同方案再免疫效采研究 第3章:SLAM(CDl50)在成人乙肝疫苗無(弱)應(yīng)答者體外PBMCs中的表達(dá)研究 第1章 成人學(xué)生、醫(yī)務(wù)人員乙型肝炎病毒感染及乙肝疫苗接種情況調(diào)查 第1節(jié) 成人學(xué)生乙型肝炎病毒感染及乙肝疫苗接種情況 方法: 無菌采集無(弱)應(yīng)答者與應(yīng)答者肝素鈉抗凝靜脈血18ml,4小時內(nèi)送至實驗室,采用淋巴細(xì)胞分離液密度梯度離心分離法,用PBS 1:1體積

3、對倍稀釋;緩緩將細(xì)胞懸液加到5ml的淋巴細(xì)胞分離液的液面上;離心(700 g/min)20min,用毛細(xì)吸管輕輕抽取出位于血漿與分離液界面層呈自膜狀的PBMCs,用無菌PBS液反復(fù)洗PBMC,離心去上清。其中1支管中細(xì)胞懸液,直接對細(xì)胞表面抗原進(jìn)行染色標(biāo)記,上流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞膜表面分子CD150,另2支管細(xì)胞懸液,接種子平底細(xì)胞培養(yǎng)板中。 結(jié)論: 1.男性學(xué)生較女性學(xué)生更易成為乙型肝炎病毒的易感人群,是乙肝疫苗接種的重

4、要群體。 2.隨著年齡的增加,乙肝疫苗接種效果(HBsAb陽性率)逐漸降低;需要接種乙肝疫苗者則隨著年齡的增加而增多。 3.加強學(xué)生的乙肝疫苗接種工作對乙型肝炎的防治措施仍屬必要。對接種年限大于3年者,可進(jìn)行抗-HBs監(jiān)測,及時進(jìn)行加強免疫。 對接種乙肝疫苗后無(弱)應(yīng)答的成人,復(fù)種(仍使用原標(biāo)準(zhǔn)劑量)、增加疫苗劑量和聯(lián)合粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)三種方案再免疫均可提高部分無(弱)應(yīng)答者的抗-H

5、Bs應(yīng)答率,而增加疫苗劑量組和聯(lián)合GM—CSF組方案免疫效果(抗-HBs陽轉(zhuǎn)率和抗體免疫水平)均優(yōu)于單純復(fù)種組,但仍不能完全消除無應(yīng)答狀態(tài)。是否應(yīng)加大劑量繼續(xù)免疫,有待進(jìn)一步臨床研究。 1研究對象的篩選對上述(第2章)既往兩年曾行乙肝疫苗接種、乙肝兩對半檢測均陰性的成年人接受標(biāo)準(zhǔn)程序(0,1,6月)再免疫后,于再接種后第7~12月檢測抗HBs滴度(IMx,AUSAB試劑盒)。 方法: 無菌采集無(弱)應(yīng)答者與應(yīng)答

6、者肝素鈉抗凝靜脈血18ml,4小時內(nèi)送至實驗室,采用淋巴細(xì)胞分離液密度梯度離心分離法,用PBS 1:1體積對倍稀釋;緩緩將細(xì)胞懸液加到5ml的淋巴細(xì)胞分離液的液面上;離心(700g/min)20min,用毛細(xì)吸管輕輕抽取出位于血漿與分離液界面層呈自膜狀的PBMCs,用無菌PBS液反復(fù)洗PBMC,離心去上清。其中1支管中細(xì)胞懸液,直接對細(xì)胞表面抗原進(jìn)行染色標(biāo)記,上流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞膜表面分子CD150,另2支管細(xì)胞懸液,接種子平底細(xì)胞培養(yǎng)

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