替米沙坦對(duì)2型糖尿病大鼠心肌NADPH氧化酶亞單位表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　 用高糖、高脂飲食加小劑量鏈脲佐菌素(STZ)的方法制備2型糖尿病模型。觀察尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)氧化酶亞單位Nox4、p22phox在2型糖尿病大鼠心肌組織的表達(dá)情況，討論替米沙坦對(duì)2型糖尿病大鼠心肌NADPH氧化酶亞單位Nox4、p22phox表達(dá)的影響。
　　 方法:
　　 36只清潔級(jí)Wistar雄性大鼠，利用隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為兩組:即健康對(duì)照組（A組，n=10），和糖尿病模型

2、組(n=26)。A組大鼠普通飼料健康喂養(yǎng)，模型組大鼠給予高糖高脂配比后的飼料喂養(yǎng)。4周后，給模型組大鼠的腹腔內(nèi)注射小劑量(30mg/kg)STZ。第6周末檢測(cè)空腹血糖(FBG)，如果FBG≥7.8mmol/L同時(shí)出現(xiàn)胰島素抵抗即為造模成功，20只大鼠成模。將成模大鼠隨機(jī)分為糖尿病組（B組，n=10），及替米沙坦治療組（C組，n=10），C組大鼠給予替米沙坦5mg/kg/d灌胃，予A組和B組大鼠等量的生理鹽水灌胃。持續(xù)干預(yù)12周，所有實(shí)驗(yàn)

3、大鼠禁食、禁水12小時(shí)，稱體重，麻醉，靜脈取血，制備成血漿標(biāo)本，取樣分別檢測(cè)空腹血糖，血脂聯(lián)素，血胰島素和血脂，利用公式計(jì)算得出胰島素敏感指數(shù)。完成檢測(cè)后大鼠處死，取出心臟，生理鹽水沖洗，濾紙吸干水分，稱心臟重量。取下一部分左心室福爾馬林液固定后做成石蠟切片備免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)銅一鋅一超氧化物歧化酶(Cu-Zn-SOD)、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)的蛋白表達(dá)水平，另一部分左心室放入液氮中直至凍透，-70℃環(huán)境下準(zhǔn)備用于實(shí)時(shí)熒光定量

4、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)的方法檢測(cè)大鼠心肌Nox4、p22phoxmRNA水平的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1.-般情況
　　 與A組正常對(duì)照組相比，B組糖尿病大鼠的空腹血糖、血漿胰島素、血總膽固醇及血甘油三酯明顯升高，心重/體重比值增大（P＜0.05），血漿脂聯(lián)素水平、胰島素敏感指數(shù)明顯降低(P＜0.05)。經(jīng)替米沙坦治療后，C組大鼠空腹血糖、血漿胰島素、血總膽固醇及血甘油三酯下降，心重/體重比值減?。≒＜<0.

5、05），血漿脂聯(lián)素水平和胰島素敏感指數(shù)均上升（P＜0.05）。
　　 2.心肌組織Nox4、p22phoxmRNA表達(dá)
　　 與A組正常對(duì)照組相比，B組糖尿病大鼠心肌組織Nox4、p22phoxmRNA表達(dá)顯著增多（P＜O.05），經(jīng)替米沙坦治療后，C組大鼠心肌組織Nox4、p22phoxmRNA表達(dá)下降(P＜O.05)。
　　 3.心肌組織CTGF蛋白表達(dá)
　　 與A組正常對(duì)照組相比，B組糖尿病大鼠心肌

6、組織CTGF蛋白表達(dá)顯著升高（P＜0.05），經(jīng)替米沙坦治療后，C組大鼠心肌組織CTGF蛋白表達(dá)有所下降（P＜0.05）。
　　 4.心肌組織Cu-Zn-SOD蛋白表達(dá)
　　 與A組正常對(duì)照組相比，B組糖尿病大鼠心肌組織Cu-Zn-SOD蛋白表達(dá)顯著降低（P＜0.05）。經(jīng)替米沙坦治療后，C組大鼠心肌組織Cu-Zn-SOD蛋白表達(dá)明顯升高(P＜O.05)。
　　 5.光鏡下觀察大鼠心肌組織HE染色
　　

7、A組大鼠心肌纖維走行整齊，無肥大，細(xì)胞核明顯可見，呈圓形或橢圓形，整齊的排列在細(xì)胞中心。B組糖尿病大鼠心肌纖維肥大，排列紊亂，腫脹，斷裂，心肌細(xì)胞邊界不清，細(xì)胞核大小不規(guī)則。替米沙坦治療后，C組大鼠較B組糖尿病大鼠心肌病理改變明顯好轉(zhuǎn)。
　　 結(jié)論:
　　 糖尿病大鼠心重/體重比值增大，心肌Nox4、p22phoxmRNA表達(dá)升高，心肌CTGF蛋白表達(dá)升高，心肌Cu-Zn-SOD蛋白表達(dá)降低，血漿脂聯(lián)素水平下降。經(jīng)替米沙