Sa抗原相關(guān)蛋白質(zhì)的研究.pdf

1、Sa抗原／抗Sa抗體系統(tǒng)是近十余年來發(fā)現(xiàn)的類風濕關(guān)節(jié)炎(RheumatoidArthritis，RA)的血清學指標，對RA高度特異，并且和病情嚴重程度相關(guān)。對Sa抗原／抗Sa抗體系統(tǒng)的研究有助于推對其在臨床的應用和闡明RA的發(fā)病機制。 本研究以陰離子交換層析法從新鮮人胎盤組織提取含有Sa抗原的人胎盤提取物(Human Placenta Extracts，HPE)，用Sa陽性病人血清進行免疫印跡法檢測抗Sa抗體為相對分子量5000

2、0(和)55000印跡陽性條帶。對30例健康對照血清和6例各種風濕病標準血清的抗Sa抗體檢測均陰性。檢測155例各種風濕病患者血清(RA7l例、強直性脊柱炎11例、銀屑病關(guān)節(jié)炎7例、反應性關(guān)節(jié)炎7例、幼年特發(fā)性關(guān)節(jié)炎4例、骨性關(guān)節(jié)炎5例、風濕性多肌痛6例、痛風6例、系統(tǒng)性紅斑狼瘡7例、干燥綜合征10例、炎性肌病8例、混合性結(jié)締組織病4例、白塞病6例、成人Still病3例)，抗Sa抗體對RA的診斷敏感性和特異性分別為47.9％和95.2％

3、，陽性預測值和陰性預測值分別為89.5％和68.4％。 本研究以質(zhì)譜研究Sa抗原的生化本質(zhì)。切取抗Sa抗體陽性印跡條帶對應的膠上條帶，胰蛋白酶膠內(nèi)酶解，高效液相色譜一電噴霧一離子阱串聯(lián)質(zhì)譜鑒定，SEQUIEST程序檢索NCBI NR數(shù)據(jù)庫，鑒定出目標蛋白質(zhì)為波形蛋白(vimerltin)。 為進一步確認目標蛋白質(zhì)，本研究對人胎盤提取物進行雙向電泳，免疫印跡法檢測抗Sa抗體，得到Sa抗原的相對分子量(約50 000)和等電

4、點(約5.0)信息，與波形蛋白相符合。 本研究在大腸桿菌重組表達人波形蛋白，但免疫印跡法檢測其抗體對RA的診斷敏感度低(36.6％)，特異性差(83.3％)，與抗Sa抗體的符合率低(Kappa=0.316)，說明兩者抗原性存在較大差異。 本研究繼而對重組人波形蛋白進行了瓜氨酸化修飾，檢測抗體發(fā)現(xiàn)其抗原性顯著改變?？构习彼峄ㄐ蔚鞍卓贵w對診斷RA的敏感性和特異性分別為49.3％和86.9％，與抗Sa抗體的一致性較高(Kap