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文檔簡介
1、目的:觀察氟伐他汀(Flu)對血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)誘導的大鼠腎小球系膜細胞(HBZY-1)血管緊張素Ⅱ1型、2型受體(AT1R、AT2R)表達的影響,探討Flu在高血壓腎損害腎小球硬化中的腎保護機制。
方法:1.選擇處于對數(shù)生長期的3-8代HBZY-1細胞用于實驗。2.將HBZY-1分成(1)正常對照組(C組):用含10%胎牛血清的MEM培養(yǎng)基培養(yǎng);(2)AngⅡ誘導組(A組):在含血清培養(yǎng)基中分別加入不同濃度(0.1
2、、1.0、10umol/L)AngⅡ共同培養(yǎng),分別稱為A1、A2、A3組;(3)Flu干預組(F組):在含血清培養(yǎng)基中先分別加入不同濃度(0.1、1.0、10umol/L)Flu預處理1h后再加入1.0umol/LAngⅡ誘導,分別稱為F1、F2、F3組。3.細胞藥物作用48h后檢測指標:(1)采用WesternBlot法檢測各組HBZY-1AT1R及AT2R蛋白表達水平;(2)MTT法檢測HBZY-1細胞增殖水平;(3)ELISA法檢
3、測各組上清液中轉化生長因子β1(TGF-β1)和Ⅳ型膠原(ColⅣ)的表達水平。
結果:1.AngⅡ誘導后:(1)A1、A2、A3組AT1R蛋白表達分別為(0.227±0.015,0.493±0.025,0.657±0.047),與C組(0.117±0.012)相比,均P<0.01,HBZY-1的AT1R蛋白表達隨AngⅡ誘導濃度的增加而增高(P<0.01);(2)A1、A2、A3組AT2R蛋白表達分別是(0.325±0.
4、016,0.217±0.017,0.123±0.001)與C組(0.406±0.026)相比,均P<0.01,HBZY-1的AT2R蛋白表達隨著AngⅡ誘導濃度的增加而降低(P<0.01);(3)HBZY-1AT1R蛋白表達與細胞增殖、TGF-β1及ColⅥ的表達均呈正相關(R=0.986、0.937、0.973,均P≤0.001);(4)HBZY-1AT2蛋白表達與細胞增殖、TGF-β1及ColⅥ的表達均呈負相關(R=-0.990、.
5、0.934、-0.973,均P≤0.001)。2.Flu干預后:(1)F1、F2、F3組AT1R蛋白表達分別是(0.970±0.010,0.550±0.036,0.247±0.015)與A組(1.207±0.021)相比,均P<0.01,HBZY-1的AT1R蛋白表達隨著Flu干預濃度的增加而降低(P<0.01);(2)F1、F2、F3組AT2R蛋白表達分別是(0.353±0.015,0.718±0.016,0.820±0.016)與A
6、組(0.173±0.008)相比,均P<0.01,HBZY-1的AT2R蛋白表達隨著Flu干預濃度的增加而增高(P<0.01);(3)HBZY-1AT1R蛋白表達與細胞增殖、TGF-β1及ColⅥ的表達均呈正相關(R=0.990、0.819、0.909,均P≤0.001);(4)HBZY-1AT2R蛋白表達與細胞增殖、TGF-β1及ColⅣ的表達均呈負相關(R=-0.634、-0.768、-0.683,均P≤0.001)。
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