單核細(xì)胞趨化因子-1誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化生長因子-β表達(dá)及其與高血壓心肌纖維化關(guān)系的研究.pdf

1、心肌纖維化是高血壓心臟重塑的重要病理改變之一.業(yè)已證實(shí),心肌纖維化導(dǎo)致心臟順應(yīng)性降低,僵硬度增加,心臟功能下降.新近研究表明,高血壓心肌纖維化伴隨有冠狀動脈周圍和心肌間質(zhì)的單核細(xì)胞的浸潤.這種現(xiàn)象提示炎癥反應(yīng)可能也是高血壓心肌纖維化的原因之一.迄今為止,炎癥反應(yīng)在高血壓心肌纖維化中的作用尚未闡明.心肌組織中單核細(xì)胞浸潤的機(jī)制尚不清楚.單核細(xì)胞趨化蛋白-1(mononuclear chemotaxis protein-1,MCP-1)是C

2、C型趨化蛋白的一種,對單核細(xì)胞有特異性的趨化作用.MCP-1可能是引起心肌組織中單核細(xì)胞浸潤的原因之一.轉(zhuǎn)化生長因子-β(transforming growthfactor-β,TGF-β)在多種類型的組織纖維化過程中起著重要的作用.單核細(xì)胞是多種組織內(nèi)TGF-β的重要來源之一.核轉(zhuǎn)錄因子-κB(nucleartranscriptfactor-κB,NF-κB)在多種組織炎癥反應(yīng)中起重要介導(dǎo)作用,其對成纖維細(xì)胞分泌MCP-1的作用尚不明

3、確.該研究課題觀察MCP-1在高血壓大鼠心臟中的表達(dá),研究MCP-1與TGF-β的關(guān)系,探討MCP-1對高血壓心肌纖維化中的影響,旨在闡明MCP-1在高血壓心肌纖維化中的作用機(jī)制,為防治高血壓心肌纖維化和高血壓左室肥厚提供理論依據(jù)和新的途徑.該研究以高血壓心肌纖維化動物為實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?以培養(yǎng)的成年大鼠心肌成纖維細(xì)胞(cardiac fibroblasts,CFs)和分離的大鼠單核細(xì)胞為研究對象.采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR),蛋白免

4、疫印跡(western blot),酶聯(lián)免疫吸附(ELISA),免疫組化,四唑鹽(MTT)比色試驗(yàn),圖像分析等實(shí)驗(yàn)方法,分別觀察:(1)一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)對高血壓大鼠心肌纖維化的影響;(2)NOS對高血壓心肌纖維化大鼠心肌內(nèi)MCP-1和TGF-β mRNA水平的影響;(3)血管緊張素Ⅱ?qū)Τ赡甏笫驝Fs表達(dá)MCP-1的影響;(4)NF-κB抑制劑對成年大鼠CFs表達(dá)MCP-1的影響;(5)血