轉(zhuǎn)化生長因子1致成纖維細胞thy-1，Caveolin-1表達的改變及其在肺纖維化中的意義.pdf

1、小窩蛋白1即caveolin-1，是細胞表面的穴樣內(nèi)陷(caveolae)家族的最重要的一員，具有多種生物學功能。最近研究提示caveolin-1與肺纖維化關(guān)系密切。成纖維細胞是肺纖維化主要的生物合成細胞，近年來的研究表明，成纖維細胞是一個異質(zhì)性的群體，根據(jù)細胞表面蛋白thy-1可以將成纖維細胞分為thy-1+和thy-1-兩個亞組，兩亞組在諸多方面具有不同的特性，但是兩個亞組caveolin-1蛋白的表達是否相同目前國內(nèi)外尚無報導。本

2、研究目的是從體外方法研究NIH/3T3成纖維細胞在致纖維化因子的刺激下caveolin-1表達水平的變化以及不同亞組caveolin-1表達的差異。博來霉素是肺纖維化模型是經(jīng)典的模型，我們同時檢測了博來霉素致纖維化不同時期caveolin-1表達的變化，初步探討了caveolin-1在肺纖維化動物模型中的變化意義。 材料與方法： 一、材料：NIH3T3成纖維細胞株、轉(zhuǎn)化生長因子β1、caveolin-1抗體、thy-1抗

3、體、DMEM培養(yǎng)基、胎牛血清、wistar大鼠 二、方法：流式細胞術(shù)、熒光激活細胞分選技術(shù)、免疫印跡技術(shù)、免疫組化技術(shù)。 實驗結(jié)果： 1、TGF-betal能夠?qū)е鲁衫w維細胞caveolin-1蛋白表達水平下降，并呈時間和劑量依賴性。 2、TGF-beta1并不能導致NIH3T3成纖維細胞thy-1表型改變。 3、Thy-1+亞組較thy-1-亞組caveolin-1表達水平明顯升高。 4

4、、隨著纖維化進展，caveolin-1表達水平呈下降趨勢。 討論： 肺纖維化是一種進展性、致死性的疾病。成纖維細胞是主要的生物合成細胞，具有異質(zhì)性。根據(jù)表面蛋白thy-1利用熒光激活細胞分選技術(shù)將成纖維細胞分為thy-1+和thy-1-亞組，可以更深入的了解成纖維細胞的功能和特性。Cav-1是細胞表面穴樣內(nèi)陷的重要組成部分，參與了多個系統(tǒng)、多種疾病的發(fā)生發(fā)展。我們首次探討了兩亞組cav-1表達水平，發(fā)現(xiàn)thy-1-亞組高

5、于thy-1+亞組，初步推測thy-1-亞組對于致纖維化因子的高反應性可能與cav-1的低表達有關(guān)，進一步的驗證可以通過siRNA或者腺病毒轉(zhuǎn)染的方法驗證。成纖維細胞的異質(zhì)性不僅表現(xiàn)在不同亞組對不同刺激反應性不同，而且不同部位、不同疾病的成纖維細胞thy-1表達本身也有所不同。氣管內(nèi)滴注博來霉素是肺纖維化的經(jīng)典模型，通過免疫組化對肺纖維化模型不同時期cav-1的變化做了初步的探討，表明肺纖維化的進展中同樣伴隨了cav-1的表達變化，進一