CD147對(duì)白血病細(xì)胞U937 MMPs活性的調(diào)節(jié)及其生長(zhǎng)侵襲能力的影響.pdf

1、目的：研究在脂多糖LPS誘導(dǎo)條件下，CD147的表達(dá)對(duì)白血病細(xì)胞U937基質(zhì)金屬蛋白酶MMPs分泌及其活性的調(diào)節(jié)作用，以及對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和侵襲能力的影響，從而探討CD147在白血病細(xì)胞生長(zhǎng)、浸潤(rùn)中的作用及其機(jī)制。 方法：U937細(xì)胞按照不同的處理方式分為以下四組：正常U937細(xì)胞組(對(duì)照組)，LPS(50μg/ml)誘導(dǎo)組(LPS組)，CD147單克隆抗體(10μg/ml)阻斷組(CD147 mAb組)，LPS誘導(dǎo)及CD147單克隆

2、抗體阻斷組(LPS+CD147 mAb組)。分別使用RT-PCR和流式細(xì)胞術(shù)在mRNA和蛋白水平檢測(cè)各組中CD147的表達(dá)情況；應(yīng)用RT-PcR和明膠酶譜分析MMPs的表達(dá)及活性；使用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)LPS和CD147mAb作用下U937細(xì)胞周期的變化；MTT法對(duì)各組細(xì)胞的生長(zhǎng)狀況進(jìn)行分析；將細(xì)胞經(jīng)皮下接種于裸鼠體內(nèi)，對(duì)各組間腫瘤生長(zhǎng)速度、腫瘤體積及裸鼠存活時(shí)『自J進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；體外細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞在體外運(yùn)動(dòng)和侵襲能力的變化；將DAP

3、I標(biāo)記的u937細(xì)胞經(jīng)尾靜脈注射入SCID小鼠體內(nèi)，觀察細(xì)胞在各組織器官中的轉(zhuǎn)移情況。 結(jié)果：LPS在體外能夠誘導(dǎo)白血病細(xì)胞U937表而CD147的表達(dá)，同時(shí)增強(qiáng)MMP-2和MMP-9的表達(dá)、活化和分泌；使用CD147抗體阻斷CD147后，MMP-2和MMP-9的分泌及活性下降。U937細(xì)胞在體外經(jīng)LPS誘導(dǎo)后，細(xì)胞增殖旺盛，但細(xì)胞凋亡數(shù)增加；使用CD147抗體阻斷CD147之后，能夠?qū)⒓?xì)胞周期阻斷在G0/G1期，細(xì)胞活力下降，

4、并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。CD147抗體體外預(yù)處理能夠抑制u937細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)生長(zhǎng)，使小鼠存活時(shí)間延長(zhǎng)。U937細(xì)胞經(jīng)LPS誘導(dǎo)后，其體外侵襲能力增強(qiáng)；尾靜脈注射SCID小鼠后發(fā)生肺部浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移，并檢測(cè)到CD147、MMP-2和MMP-9的表達(dá)增強(qiáng)，CD147抗體在一定程度上能夠抑制上述現(xiàn)象。 結(jié)論：LPS可誘導(dǎo)U937細(xì)胞表面CD147分子表達(dá)增加，CD147通過(guò)上調(diào)U937細(xì)胞MMP-2和MMP-9的分泌和活性，從而促進(jìn)U937細(xì)胞