晚期糖基化終產(chǎn)物修飾的β-,2-微球蛋白對(duì)人關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞病理生物學(xué)作用的研究.pdf

1、目的:該課題研究了AGE-β<,2>m對(duì)滑膜細(xì)胞的病理生物學(xué)作用,為闡明DRA時(shí)骨、關(guān)節(jié)損害機(jī)制,為臨床預(yù)防和治療DRA提供理論依據(jù).方法:分離線性化并在體外培養(yǎng)人關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞,用放射性配體-受體結(jié)合分析法檢測(cè)細(xì)胞表面的晚期糖基化終產(chǎn)物結(jié)合蛋白的表達(dá),并分析TNF-α、IL-1β和AGE-HSA對(duì)其表達(dá)的調(diào)節(jié).用ELISA法檢測(cè)AGE-<,2>m刺激下HSCs培養(yǎng)上清的MCP-1,以及抗RAGE抗體(α-RAGE)對(duì)其抑制作用;用Nor

2、thern Blot法測(cè)定HSCs MCP-1mRNA的表達(dá);用雙室法行單核細(xì)胞趨化實(shí)驗(yàn).用ELISA法檢測(cè)HSCs培養(yǎng)上清TNF-α和IL-1β,以及α-RAGE對(duì)其抑制作用;用放射免疫測(cè)定法檢測(cè)HSCs培養(yǎng)上清的透明質(zhì)酸(HA)、層粘蛋白和Ⅲ型前膠原,用Western Blot法測(cè)定分泌的HA分子量.結(jié)論:我們首次證實(shí),人類(lèi)關(guān)節(jié)固有細(xì)胞—滑膜細(xì)胞表達(dá)對(duì)AGE特異的受體,RAGE介導(dǎo)了AGE修飾蛋白引起的關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞的病理生物學(xué)改變.