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文檔簡(jiǎn)介
1、研究目的探討晚期糖基化終產(chǎn)物(AGEs)對(duì)人近端腎小管上皮細(xì)胞(PTEC)的存活/代謝活性和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)表達(dá)的干預(yù)作用;以及分子量對(duì)AGEs的生物學(xué)活性的影響,揭示AGEs在腎臟纖維化中的作用機(jī)制.研究方法1用凝膠層析法分離AGEs,用不同種類和濃度的AGEs干預(yù)人近端腎小管上皮細(xì)胞系HK-2不同時(shí)間,并用氨基胍、葛根素等在此基礎(chǔ)上進(jìn)行干預(yù),MTT法測(cè)定細(xì)胞的存活/代謝活性,半定量RT-PCR測(cè)定細(xì)胞CTGF和纖維結(jié)合素
2、(FN)mRNA表達(dá)水平.結(jié)果1 HK-2細(xì)胞的存活/代謝活性隨著孵育AGEs的葡萄糖濃度、AGEs的濃度以及干預(yù)時(shí)間的增加而降低(P<0.05);2 HK-2細(xì)胞中的CTGF mRNA表達(dá)量隨著孵育AGEs的葡萄糖濃度、AGEs的濃度以及干預(yù)時(shí)間的增加而增加(P<0.05);3氨基胍和葛根素呈濃度依賴性抑制AGEs對(duì)HK-2細(xì)胞的存活/代謝活性和CTGF mRNA表達(dá)量的影響(P<0.05);4 AGE-BSA呈時(shí)間和濃度依賴性地增加
3、HK-2細(xì)胞的FN mRNA的表達(dá);CTGF反義寡核苷酸可以部分抑制此效應(yīng)(P<0.05);5 AGEs經(jīng)凝膠層析分離后各組分之間的熒光光譜和相對(duì)熒光強(qiáng)度沒(méi)有顯著差異;6 AGE-BSA分離前后各組分對(duì)細(xì)胞的存活/代謝活性和CTGF mRNA水平的影響不盡相同,各組分消化后得到的AGE肽之間的生物學(xué)活性沒(méi)有明顯差異(P>0.05),但均高于消化前(P<0.05).結(jié)論1 AGEs抑制PTEC的存活/代謝活性,增加其CTGF mRNA表達(dá)
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