沙漠嘎種子平喘活性成分篩選及其質(zhì)量研究.pdf

1、沙漠嘎種子平喘活性成分篩選及其質(zhì)量研究 沙漠嘎，原植物為菊科蒿屬植物差把嘎蒿ArtemisiahalodendronTurcz.，味辛性溫，具有止咳祛痰平喘，解表祛濕的功效。主治慢性氣管炎，哮喘；風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。我國(guó)藥典(2005版)尚未對(duì)其收載。文獻(xiàn)記載該藥以嫩枝葉入藥，但民間及臨床應(yīng)用主要以種子為藥用部位。 經(jīng)文獻(xiàn)檢索，尚未發(fā)現(xiàn)關(guān)于該藥活性成分和藥理研究的報(bào)道。課題組前期對(duì)其化學(xué)成分和抗炎藥效學(xué)進(jìn)行了研究。在此基礎(chǔ)上，

2、本研究以祛痰、平喘為藥效學(xué)指標(biāo)，篩選沙漠嘎種子的活性部位，并追蹤其活性成分；尋找該藥的有效(活性)成分，明確其藥理作用，并建立初步的質(zhì)量控制方法，為該藥的應(yīng)用及新藥研制開發(fā)提供基礎(chǔ)藥學(xué)資料。 主要研究?jī)?nèi)容如下：1.藥效學(xué)篩選：為研究沙漠嘎種子平喘有效部位，本文采用三種整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法(小鼠酚紅祛痰法、豚鼠組胺噴霧致喘法、小鼠卵蛋白復(fù)制法)考察了沙漠嘎種子在祛痰、哮喘速發(fā)相、哮喘遲發(fā)相三個(gè)哮喘相關(guān)模型中的作用，并以系統(tǒng)極性分類法篩

3、選其有效部位，結(jié)果表明，沙漠嘎種子在祛痰與哮喘遲發(fā)相模型中治療效果較好，其中B部位和C部位為有效部位。 2.化學(xué)成分研究：為探討沙漠嘎種子平喘有效部位的化學(xué)成分，本文對(duì)有效部位C進(jìn)行提取分離，得到五個(gè)化合物，經(jīng)理化常數(shù)測(cè)定、波譜解析等方法，分別鑒定為異櫻花素(Ⅰ)、山柰素-7,4'-二甲醚(Ⅱ)、圣草酚-7-甲醚(Ⅲ)、鼠李素(Ⅳ)和胡蘿卜苷(Ⅴ)，其中前兩個(gè)化合物為首次從該植物中得到。采用氣相色譜－質(zhì)譜(GC-MS)聯(lián)用技術(shù)，

4、對(duì)有效部位B進(jìn)行分析，鑒定出34種化合物，主要為不飽和脂肪酸類和萜烯類成分，其中9,12-十八碳二烯酸乙酯的含量最大。同時(shí)與沙漠嘎枝葉中同部位的化學(xué)成分比較，發(fā)現(xiàn)有19種相同成分。 3.5-脂氧酶體外抗炎模型篩選：為探討沙漠嘎種子平喘有效部位的活性成分及作用靶點(diǎn)，本文結(jié)合藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)中該藥對(duì)哮喘遲發(fā)相療效較好的結(jié)果和哮喘發(fā)生機(jī)制，選取5-脂氧酶體外抗炎模型對(duì)沙漠嘎種子有效部位及活性成分進(jìn)行篩選追蹤。結(jié)果表明，有效部位篩選結(jié)果與體內(nèi)

5、藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)一致，有效部位中的三種成分有抑制5-脂氧酶的作用，同時(shí)分別測(cè)定了它們的濃度與5-脂氧酶抑制率的量效關(guān)系。 4.質(zhì)量研究：本文結(jié)合沙漠嘎種子體內(nèi)、體外藥效學(xué)篩選實(shí)驗(yàn)和化學(xué)成分研究結(jié)果，確定沙漠嘎種子總黃酮為其平喘有效部位。為了深入研究其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，有效控制其內(nèi)在質(zhì)量，本文考察了三種總黃酮的含量測(cè)定方法，確定Al(NO3)3-NaNO2-NaOH比色法為最佳，測(cè)定沙漠嘎種子總黃酮含量為1.3％，并以總黃酮含量為指標(biāo)優(yōu)選其