短柄枹櫟種子抗炎活性成分研究.pdf

1、短柄枹櫟(Quercus serrata var. brevipetiolata)是殼斗科(Fagaceae)櫟屬(Quercus)植物枹櫟(Quercus serrata)的一個(gè)變種。據(jù)《中國植物志》記載，殼斗科櫟屬植物在全世界約300種，其中我國有51種，14變種，1變型，多為經(jīng)濟(jì)和藥食兩用植物。
　　目前對櫟屬植物的研究較多，但關(guān)于短柄枹櫟化學(xué)成分及藥理活性的研究文獻(xiàn)較少，特別是關(guān)于其種子的研究尚未見報(bào)道。已知從櫟屬植物中分

2、離鑒定的化合物主要有黃酮類、三萜類、鞣質(zhì)類、生物堿類和揮發(fā)油等?，F(xiàn)代藥理研究表明，這些化合物具有抗氧化、抗菌和抗病毒、抗炎、抗腫瘤等作用。本研究選擇短柄枹櫟的種子為研究對象，對其化學(xué)成分進(jìn)行研究，以期進(jìn)一步闡明短柄枹櫟種子中的生物活性成分，尋找新的活性先導(dǎo)化合物。
　　本論文取34.5 kg短柄枹櫟種子，用70％乙醇回流提取四次，合并提取液減壓濃縮得混懸液30 L，再依次利用等體積的環(huán)己烷、乙酸乙酯和正丁醇進(jìn)行萃取。經(jīng)TLC初步分

3、析后選取乙酸乙酯萃取物為研究對象，經(jīng)硅膠柱層析、Sephadex LH-20、ODS柱層析和制備型HPLC等各種色譜手段分離純化，共分離得到34個(gè)化合物。根據(jù)化合物的理化性質(zhì)和波譜數(shù)據(jù)鑒定其結(jié)構(gòu)，分別鑒定為2?,3?,19?-Trihydroxy-24-oxo-olean-12-en-28-oic acid(1*)，3?-Acetoxy-2?,19?,23-trihydroxyurs-12-en-28-oic acid(2*)，3,23

4、-O-Methyl butyrate-2?,3?,19?,23-tetrahydroxy-olean-12-en-28-oic acid(3*)，3,23-O-Methyl butyrate-2?,3?,19?,23-tetrahydroxy-olean-12-en-28-oic acid?-D-glucopyranoside ester(4*)，3,23-O-Methyl butyrate-2?,3?,19?,23-tetrahydr

5、oxy-urs-12-en-28-oic acid?-D-glucopyranoside ester(5*)，3?,23-Dihydroxy-24-oxo-olean-13(18)-en-28-oic acid28-O-?-D-glucopyranoside ester(6*) Oleanolic acid(7)，Arjunolic acid(8)。Arjunglucoside II(9)，Arjungenin(10)，Arjunglu

6、coside I(11)，Arjunic acid(12)，24-Deoxysericoside(13)，Sericic acid(14)，Sericoside(15)，2?,3?,19?-Trihydroxy-olean-12-en-24,28-dioic acid28-β-D-glucopyranoside ester(16)。Paradrymoniside(17)。Glucosyl tormentate(18)，4-epi-Nig

7、a-ichigoside F1(19)，2?,3?,19?,23-Tetrahydroxy-urs-12-en-28-oic acid(20)，Niga-ichigoside F1(21)，Trachelosperoside A-1(22)，Pinfaenoic acid(23)，2?,3?,23-Trihydroxy-olean-12,18(19)-dien-28-oic acid?-D-glucopyranoside ester(2

8、4)，2?,3?,23-Trihydroxy-urs-12,19(20)-dien-28-oic acid(25)，2?,3?,23-Trihydroxyurs-12,19(20)-dien-28-oic acid28-O-?-D-glucopyranoside ester(26)，2?,3?,23-Trihydroxyurs-12,19(29)-dien-28-oic acid(27)，Quadranoside VIII(28)，Qu

9、adranoside X(29)，2?,3?,23-Trihydroxyurs-11,13(18)-dien-28-O-?-D-glucopyranoside ester(30)，5-Hydroxymethylfurfural(31)。Gallic acid(32)，?-Daucosterol(33)，Palmitic acid(34)。以上所有化合物均是從該植物中首次分離，其中化合物1-6為新化合物。同時(shí)測試了化合物對一氧化氮(NO)

10、、炎癥因子IL-6和IL-8等的抑制活性。在抑制NO的生成實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)除了化合物9，15和16外，其余的三萜類化合物對脂多糖誘導(dǎo)的RAW264.7產(chǎn)生的NO均表現(xiàn)較強(qiáng)的抑制作用。與陽性對照藥吲哚美辛(IC50=47.4?M)相比較，化合物1，4，7，11，13，23，25，27的抗炎活性更為顯著，IC50值分別為5.4，8.2，7.8，4.0，8.9，8.6，6.3和5.4?M；化合物2，5，8，12，14，17，18，19，21的IC