大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對(duì)氣道黏液高分泌過程的調(diào)控作用及分子機(jī)制研究.pdf

1、目的探討細(xì)菌內(nèi)毒素誘導(dǎo)大鼠氣道炎癥和黏液高分泌過程的機(jī)制；了解十四元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素對(duì)氣道黏液高分泌過程的調(diào)控作用；探討十四元大環(huán)內(nèi)酯類抗生素參與氣道黏液高分泌調(diào)控的分子機(jī)制。 方法大鼠氣道內(nèi)注入脂多糖(LPS)建立氣道黏液高分泌模型。分別給予羅紅霉素(1～10 mg／kg)、交沙霉素(10 mg／kg)和阿莫西林(40 mg／kg)管喂4天。提取肺組織和支氣管肺泡灌洗液，采用HE染色、AB-PAS染色方法了解肺組織病理改變和杯

2、狀細(xì)胞增生情況，采用Bradford法、ELLA和ELISA方法對(duì)BALF中蛋白滲出、粘蛋白分泌以及炎癥細(xì)胞因子(IL-1β、IL-8和TNF-α)水平進(jìn)行定量檢測，采用RT-PCR、免疫組織化學(xué)及Western blot方法檢測粘蛋白Muc5ac及信號(hào)蛋白p38、ERKl／2、NF-кB等的表達(dá)水平，結(jié)果 LPS刺激可以使大鼠氣道上皮Muc5ac mRNA和蛋白表達(dá)增高，使支氣管肺泡灌洗液中中性粒細(xì)胞增多、粘蛋白含量增高、炎癥細(xì)胞因子

3、(IL-1β、IL-8和TNF-α)表達(dá)增加。同時(shí)氣道上皮細(xì)胞NF-кB的表達(dá)和NF-кB入核率增高，支氣管肺組織胞漿內(nèi)p38、ERKl／2和核內(nèi)NF-кB的表達(dá)量均增高。相關(guān)分析顯示NF-кB的活化、炎性細(xì)胞因子水平與Muc5ac mRNA的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系。羅紅霉素(5mg/kg和10mg/kg)可以抑制由LPS所致的Muc5ac高表達(dá)和NF-KB核內(nèi)轉(zhuǎn)移，抑制肺組織中性粒細(xì)胞聚集、肺泡灌洗液中中性粒細(xì)胞數(shù)量和炎癥細(xì)胞因子水平。但對(duì)