高遷移率族蛋白B1在香煙暴露大鼠模型中的表達(dá)及其意義.pdf

1、背景:慢性支氣管炎(chronic bronchitis)是一種全球性患病率和死亡率很高而病因及發(fā)病機(jī)制尚不完全清楚的疾病,嚴(yán)重危害著中老年患者的健康,目前認(rèn)為是一種可防可治的疾病。危險(xiǎn)因素包括吸煙、粉塵、刺激性氣體、感染、免疫、年齡、氣候等,其中吸煙是引起慢性支氣管炎發(fā)生、發(fā)展的最主要等危險(xiǎn)因素。煙熏法復(fù)制慢性支氣管炎動(dòng)物模型的研究已有成功應(yīng)用。高遷移率族蛋白 B1(high mobility group box-1 protein,

2、HMGB1)是一種普遍存在的高度保守的核蛋白,參與DNA的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制、修復(fù)以及炎癥反應(yīng)等。正常情況下,人類和大鼠氣道內(nèi)即有一定水平HMGB1表達(dá),對(duì)呼吸系統(tǒng)正常功能的維持具有重要作用。在肺組織中, HMGB1具有促炎細(xì)胞因子的作用,是介導(dǎo)急性肺部炎癥反應(yīng)重要的生物學(xué)介質(zhì)。HMGB1可作為一種晚期重要的炎癥因子參與對(duì)炎癥的調(diào)控作用,在肺損傷、肺癌、肺纖維化、COPD等肺部疾病中已有大量研究,但HMGB1在大鼠慢性支氣管炎模型中的作用尚無(wú)報(bào)

3、道。因此本研究用煙熏法模擬人類慢性支氣管炎的發(fā)病過(guò)程擬檢測(cè)HMGB1在大鼠模型中的表達(dá),初步探討HMGB1在慢性支氣管炎中的作用。
　　目的:通過(guò)煙熏法建立大鼠慢性支氣管炎模型,檢測(cè)大鼠模型肺組織及血清中HMGB1的表達(dá)情況,比較HMGB1在模型組與對(duì)照組兩組之間的差別,初步探討HMGB1在香煙誘導(dǎo)的慢性支氣管炎大鼠模型中的作用。
　　方法:將雄性SD大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、吸煙模型組,每組14只。模型組大鼠置于自制密閉煙熏

4、箱內(nèi)進(jìn)行被動(dòng)吸煙,每天煙熏2次,每次14支,煙熏30min,煙霧濃度約5％(v/v),兩次之間相隔不少于4 h,每周被動(dòng)吸煙6d,連續(xù)75 d,對(duì)照組正常飼養(yǎng),不作上述處理,建立慢性支氣管炎大鼠模型。模型成功后,光鏡下觀察支氣管肺組織病理形態(tài)學(xué)改變,分析支氣管肺泡灌洗液(BALF)細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類,用 ELISA法檢測(cè)大鼠血清中HMGB1的濃度,免疫組化法檢測(cè)HMGB1在肺組織中的表達(dá)。
　　結(jié)果:模型組大鼠肺組織的病理形態(tài)改變與人

5、類慢性支氣管的特點(diǎn)相一致。模型組和健康對(duì)照組大鼠BALF的細(xì)胞總數(shù)、單核巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞百分比分別為(5.12±0.69×108/L、69.62±4.82%、22.62±2.47%;1.79±0.19×108/L、86.00±2.45%、7.71±1.27%),兩組相比差異有顯著性意義(P＜0.05)。說(shuō)明慢性支氣管炎大鼠模型是成功的。模型組與對(duì)照組血清中HMGB1分別為(2.41±0.31 ug/L,1.60±0.16 ug/L)

6、,與對(duì)照組相比,模型組大鼠血清 HMGB1的含量顯著升高(P＜0.05)。對(duì)大鼠肺組織進(jìn)行免疫組化染色觀察HMGB1的表達(dá),可見(jiàn)HMGB1主要分布于支氣管及肺泡上皮細(xì)胞,與對(duì)照組比較,模型組大鼠肺組織HMGB1的表達(dá)強(qiáng)度明顯增強(qiáng),用圖形分析軟件對(duì)染色結(jié)果進(jìn)行分析,測(cè)量并記錄每個(gè)視野HMGB1的陽(yáng)性染色的平均積分光密度值(IOD),模型組與對(duì)照的IOD)進(jìn)行比較,有顯著性差異(P＜0.05)。
　　結(jié)論:1.與對(duì)照組相比,模型組大鼠