大鼠到小鼠異種胰島移植模型建立及其免疫學(xué)特點(diǎn)研究.pdf

1、【目的】建立大鼠到小鼠異種胰島移植模型，并探討這種協(xié)調(diào)性異種胰島移植排斥反應(yīng)發(fā)生的機(jī)制及病理學(xué)特點(diǎn)。
　　 【方法】使用Ⅴ型膠原酶，采用內(nèi)消化法分離培養(yǎng)SD大鼠胰島。采用0.5％四氧嘧啶建立C57BL/6小鼠糖尿病模型。采用400個(gè)胰島當(dāng)量（Islets Equivalent Quantity，IEQ）的SD大鼠胰島移植到糖尿病C57BL/6小鼠左腎包膜下（n=6）。移植后每日監(jiān)測(cè)血糖水平及體重觀察移植物存活情況。胰島移植物失功

2、后，取胰島移植物標(biāo)本行蘇木素-伊紅（HE）和免疫組織化學(xué)染色，觀察胰島移植區(qū)CD3+T、CD4+T、CD8+T、CD20+B淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤(rùn)及針對(duì)供者特異性抗體IgG、IgM的沉積情況。胰島移植物失功后，檢測(cè)受者血清抗供者特異性抗體IgG水平。
　　 【結(jié)果】 C57BL/6糖尿病小鼠接受400個(gè)胰島當(dāng)量SD大鼠胰島細(xì)胞移植后，C57BL/6糖尿病小鼠血糖均在48小時(shí)內(nèi)降到正常水平。胰島移植后的C57BL/6糖尿病小鼠體重

3、逐漸增加。大鼠到小鼠異種胰島移植模型中胰島平均存活時(shí)間為：6.67±0.52天。發(fā)生排斥后的移植標(biāo)本HE染色可見(jiàn)異種胰島移植區(qū)大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。免疫組織化學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)移植區(qū)有大量CD3+T、CD8+T淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，CD4+T、CD20+B淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤(rùn)相對(duì)較少。除此以外，異種胰島移植區(qū)還有明顯的抗供者特異性抗體IgG、IgM沉積。流式檢測(cè)發(fā)現(xiàn)排斥時(shí)受者小鼠血清中針對(duì)供者大鼠外周血淋巴細(xì)胞特異性抗體IgG水平較移植前明顯升高（Gme