靛玉紅口服吸收機(jī)理研究.pdf

1、靛玉紅是青黛的抗腫瘤有效成分，因其副作用小而被一些研究者看好。但由于靛玉紅水溶性很差，脂溶性也不理想，導(dǎo)致吸收不佳，而給藥劑量較大。因此，本課題以靛玉紅的口服吸收機(jī)理研究為目的，建立了適用于難溶性成分吸收研究的大鼠原位灌注模型、腸襻模型和整體動(dòng)物模型，為靛玉紅口服給藥系統(tǒng)設(shè)計(jì)奠定理論基礎(chǔ)。 原位胃灌注實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，大鼠胃對(duì)低、中、高濃度靛玉紅的每小時(shí)平均吸收分?jǐn)?shù)分別為25.88％、15.48％、20.12％，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，為被動(dòng)

2、轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。 原位腸灌注實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，靛玉紅吸收較差，在4～16μg·ml<'-1>范圍內(nèi)K<,a>值基本保持不變，表現(xiàn)為類(lèi)似于被動(dòng)擴(kuò)散的一級(jí)吸收動(dòng)力學(xué)過(guò)程；各部位吸收速率依次為十二指腸≥回腸>結(jié)腸>>空腸。盡管是否結(jié)扎膽管對(duì)表觀(guān)吸收參數(shù)影響不大，但未結(jié)扎膽管時(shí)，小腸全腸段和十二指腸灌注液的剩余藥量-時(shí)間曲線(xiàn)波動(dòng)較大，結(jié)扎膽管后波動(dòng)明顯減弱。 大鼠灌胃給藥藥動(dòng)學(xué)結(jié)果顯示，靛玉紅口服給藥后，血藥濃度一直處于較低水平，低、中、

3、高劑量給藥的絕對(duì)生物利用度分別為48.33％、45.98％和38.65％。40、60、90 mg·kg<'-1>3個(gè)劑量的AUC<,0→∞>/X<,0>存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，可見(jiàn)，在40～90mg·kg<'-1>劑量范圍內(nèi)，口服靛玉紅的體內(nèi)過(guò)程符合吸收飽和的非線(xiàn)性動(dòng)力學(xué)。 腸襻實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與維拉帕米合用能顯著提高靛玉紅的吸收，白藜蘆醇的存在盡管使靛玉紅的表觀(guān)吸收分?jǐn)?shù)降低，但血藥濃度卻比單用靛玉紅時(shí)略有升高。提示靛玉紅可能是P-gp或

4、CYP 3A4和CYP 1A1或CYP 1B1的底物，抑制腸道外排或腸道代謝可能是解決靛玉紅不良吸收的方法之一。PVP K<,30>能增加靛玉紅在水中的溶解度，但不能顯著改善靛玉紅的吸收。加入膽鹽或卵磷脂能改善靛玉紅的溶解行為，有助于改善其口服吸收。針對(duì)上述吸收特點(diǎn)，本課題制備了靛玉紅的固體分散體和磷脂復(fù)合物，并對(duì)其進(jìn)行了腸襻實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，制劑吸收率均高于單純物理混合物，提示靛玉紅吸收性質(zhì)有望通過(guò)制劑學(xué)的手段改善。 膽汁排泄實(shí)

5、驗(yàn)結(jié)果顯示，頸靜脈注射靛玉紅后3 h內(nèi)，膽汁中一直能檢測(cè)到靛玉紅，且膽汁中藥物濃度隨時(shí)間略有波動(dòng)，80 min時(shí)靛玉紅濃度最高。表明靛玉紅可能存在腸肝循環(huán)。膽汁中除靛玉紅外，還檢測(cè)到兩個(gè)未知成分，提示靛玉紅可能還以其它形式經(jīng)膽汁排泄。 大鼠原位模型與整體模型的相關(guān)性分析結(jié)果表明，上述兩個(gè)模型具有吸收程度的一致性和吸收速率的差異性。其差異主要包括：方法因素、劑量因素和生理因素。因此，原位模型的研究方法可以作為研究藥物吸收機(jī)理、預(yù)測(cè)

6、藥物吸收規(guī)律的有效輔助手段，與體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)合應(yīng)用，綜合評(píng)價(jià)同一藥物的體內(nèi)過(guò)程可增加實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析的合理性。 本課題的難點(diǎn)在于：(1)靛玉紅溶解度低、穩(wěn)定性差，建立原位模型和整體模型均較為困難；(2)增溶劑用量的篩選及對(duì)吸收影響的考察難以實(shí)施；(3)靛玉紅口服給藥體內(nèi)濃度低，且不同個(gè)體間血藥濃度差異大；(4)采血時(shí)間長(zhǎng)、采血量大，且要保證全血取樣的準(zhǔn)確性，并篩選適宜的沉淀劑和萃取劑；(5)體內(nèi)過(guò)程復(fù)雜，需進(jìn)行綜合系統(tǒng)的研究。

7、本課題的創(chuàng)新性在于：(1)首次建立了靛玉紅的大鼠原位灌注模型，解決了灌注實(shí)驗(yàn)中存在的溶解問(wèn)題，并考察了增溶劑對(duì)吸收的影響，為難溶性藥物的吸收機(jī)理研究提供了有效的思路和方法；(2)首次建立了靛玉紅血藥濃度的HPLC測(cè)定方法，為靛玉紅的藥動(dòng)學(xué)研究提供了一種簡(jiǎn)便可靠的分析方法；(3)系統(tǒng)研究了靛玉紅腸道吸收和分泌、腸肝循環(huán)及促吸收方法，為靛玉紅口服制劑設(shè)計(jì)奠定了基礎(chǔ)；(4)以多生物模型、多角度研究了青黛有效成分——靛玉紅的吸收機(jī)理和吸收影響因