大鼠CFA炎癥模型中MCP-1對疼痛產生及維持的作用.pdf

1、組織損傷誘導產生的炎性疼痛的治療是臨床上的一個難題，對其產生機制的全面深入的研究是開發(fā)更為有效治療方案的重要組成部分。經過這些年的研究積累，人們已發(fā)現(xiàn)有許多機制參與了炎性疼痛的產生及維持過程，細胞因子特別是趨化因子在慢性疼痛中的作用近幾年來受到了越來越多的重視，但趨化因子在炎性疼痛中發(fā)揮什么樣的作用還有待進一步研究。我們在完全弗氏佐劑(Freund's adjuvant，complete，CFA)誘導產生的炎性疼痛大鼠模型(CFA炎性大

2、鼠)中發(fā)現(xiàn)，單核細胞趨化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)及其受體CCR2在DRG痛覺神經元中的表達升高，并可直接興奮DRG痛覺神經元；另外，已有的研究表明MCP-1的作用位點不僅在外周痛覺感受器，還可能作用在脊髓水平，這可能是炎性疼痛長時間維持、反復發(fā)作的重要原因，因此我們在研究MCP-1/CCR2信號系統(tǒng)直接興奮外周DRG痛覺神經元的基礎上，又進一步研究了MCP-1對脊髓后角

3、膠狀質層(substantia gelatinosa,SG)神經元突觸傳遞過程的調節(jié)作用。我們的研究為尋找炎性疼痛的臨床治療提供了新的作用靶點。
　　 主要研究結果如下：
　　 一、MCP-1對CFA炎性大鼠痛覺行為的易化作用
　　 1.行為學實驗研究結果表明，足底注射MCP-1能引起CFA炎性大鼠的自發(fā)性疼痛行為增強并能易化機械性痛覺過敏，表現(xiàn)為足底注射MCP-1后，大鼠由于疼痛產生的自發(fā)性后腳懸空時間增長，而

4、且在自發(fā)性疼痛行為消失后，其對機械刺激的反應閾值降低。
　　 二、CFA炎性大鼠DRG中MCP-1及CCR2的表達量升高
　　 1.熒光實時定量PCR(Real-time PCR)研究結果表明，CFA炎性大鼠DRG組織中MCP-1的mRNA表達量升高。
　　 2.Western blot技術研究結果表明，CFA炎性大鼠DRG神經元中CCR2蛋白表達量升高。
　　 三、MCP-1直接興奮CFA炎性大鼠DRG

5、痛覺神經元
　　 1.單細胞全細胞膜片鉗技術研究結果表明，在MCP-1作用1min后能增強CFA炎性大鼠DRG痛覺神經元的興奮性，表現(xiàn)為神經元的去極化，可誘發(fā)動作電位產生的閾電流閾值降低，以及相同電流刺激產生的動作電位數(shù)目增加；進一步研究發(fā)現(xiàn)MCP-1能夠增大DRG痛覺神經元TTX-S(TTX-sensitive)鈉電流的幅度，并使TTX-S鈉電流激活曲線左移，對TTX-R(TTX-resistant)鈉電流和鉀電流沒有調節(jié)作用

6、。
　　 四、MCP-1增強正常大鼠脊髓后角痛覺信息傳遞
　　 1.行為學實驗結果表明，正常大鼠鞘內注射MCP-1可直接誘導產生疼痛行為。
　　 2.脊髓片全細胞膜片鉗記錄結果表明，MCP-1能增強距常大鼠脊髓后角膠狀質層神經元自發(fā)興奮性突觸后電流(spontaneous EPSCs)并減弱自發(fā)抑制性突觸后電流(spontaneous IPSCs)，進一步研究發(fā)現(xiàn)，MCP-1的這一作用是通過增強AMPA和NMDA

7、電流并抑制GABA電流實現(xiàn)的。
　　 綜上所述，我們通過研究MCP-1/CCR2信號系統(tǒng)對CFA炎性大鼠的外周DRG痛覺神經元和正常大鼠脊髓后角膠狀質層神經元痛覺信號傳導的調節(jié)作用，表明在炎性疼痛中，MCP-1/CCR2信號系統(tǒng)通過增強外周DRG痛覺神經元的興奮性，在疼痛的產生過程中發(fā)揮了重要作用；而該信號系統(tǒng)能夠通過增強正常大鼠脊髓后角膠狀質層神經元興奮性突觸傳遞，減弱抑制性突觸傳遞，并可直接誘導產生疼痛行為，提示MCP-1/